耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌同源性分析及耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、目的：1.監(jiān)測(cè)貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院（下面簡(jiǎn)稱―我院‖）耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌（Carbapenem-resistance Acinetobacter baumannii,CRAB）的同源性，了解CRAB的流行病學(xué)特征。2.用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥和敏感的鮑曼不動(dòng)桿菌外膜通道蛋白CarO和外排泵AdeB的mRNA表達(dá)情況，探討CarO蛋白和外排泵AdeB在介導(dǎo)我院鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥中的作用。

2、　　方法:1.收集我院2011年7月至2012年8月臨床分離的耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌100株以及2015年7月至2015年9月臨床分離的對(duì)碳青霉烯酶類抗生素耐藥和敏感鮑曼不動(dòng)桿菌各20株，采用擴(kuò)增性核糖體DNA限制性酶切片段分析(amplifiedribosomal DNA restriction analysis，ARDRA)對(duì)收集的鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行分子分型，以確定其為鮑曼不動(dòng)桿菌，用于同源性及耐藥機(jī)制的研究。2.取收集于2011年

3、7月至2012年8月經(jīng)ARDRA鑒定確定為耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的菌株，采用腸桿菌科重復(fù)基因保守序列（enterbacterial repetitive intergenic consensus ERIC）PCR進(jìn)行同源性分析。3.取2015年7月至9月收集的經(jīng)ARDRA鑒定確定為鮑曼不動(dòng)桿菌的菌株，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)其外膜蛋白CarO和外排泵基因AdeB的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1.經(jīng)ARDRA分子分型，收集于2011年

4、7月至2012年8月臨床分離的100株耐藥菌株有90株確定為鮑曼不動(dòng)桿菌，收集于2015年7月至9月臨床分離的耐藥和敏感菌株均確定為鮑曼不動(dòng)桿菌。2.經(jīng)ERIC-PCR基因分型，我院臨床分離的CRAB分為A、B、C、D、E、F6型，其中A型65株，B型19株，C型3株，D型2株，E、F型各1株。3.經(jīng)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)我院分離的鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥菌株外膜蛋白 CarO的 mRNA表達(dá)量明顯低于敏感菌株，而耐藥菌株外排泵 AdeB的mR