鮑曼不動桿菌的同源性分析及耐消毒劑基因研究.pdf

1、鮑曼不動桿菌是一種非發(fā)酵革蘭陰性球桿菌。由于具有較強的耐干燥能力，且極易形成生物膜，因此可在醫(yī)院環(huán)境中長期存活，心肺復蘇機、呼吸機、吸痰器、輸注泵、淋浴噴頭、洗臉盆、床欄桿、床頭桌、洗滌槽、枕頭、床墊、繃帶和手推車等經(jīng)常被其污染。當患者患有嚴重的基礎疾?。ㄈ缪翰　⒙阅I炎、糖尿病和癌癥）或接受侵入性操作（如手術、機械通氣、留置導管）和免疫功能低下時很容易引起各種感染，包括呼吸機相關性肺炎、血流感染、泌尿道感染、傷口感染、心內膜炎、骨髓

2、炎和腹膜透析相關性感染等[1]。另外，部分鮑曼不動桿菌對幾乎所有的臨床常用藥物耐藥，包括β-內酰胺類、氨基糖苷類和喹諾酮類，甚至出現(xiàn)了對替加環(huán)素和多粘菌素耐藥的全耐藥菌株，已經(jīng)成為引起醫(yī)院感染的重要病原菌。因此必須采取有效的消毒隔離措施，防止或減少鮑曼不動桿菌在醫(yī)院環(huán)境中的定植和傳播。
　　生物殺滅劑包括防腐劑、消毒劑和滅菌劑，在醫(yī)院感染控制和預防感染性病原菌的傳播中具有重要的作用。但隨著消毒劑在醫(yī)院中廣泛大量的使用，由于受多種因

3、素的影響，其通常能達到的濃度未知，細菌有可能逐漸適應了亞致死濃度的消毒劑環(huán)境，導致對消毒劑敏感性降低甚至出現(xiàn)耐藥。多種與消毒劑耐藥有關的基因如qacE△1-sul1廣泛分布在革蘭陰性菌中。該基因位于Ⅰ類整合子上，與季銨鹽類（如苯扎氯銨、苯扎溴銨、西吡氯胺等）和雙胍類消毒劑（如氯(已)定和阿立西定）的排出有關。有研究表明[2]鮑曼不動桿菌的qacE△1-sul1基因攜帶率較高，qacE△1-sul1基因陽性表明鮑曼不動桿菌可能對季銨鹽類和

4、雙胍類消毒劑的敏感性降低甚至出現(xiàn)耐藥，應該引起感染控制部門及醫(yī)護人員的高度重視。除了季銨鹽類和雙胍類消毒劑，以三氯異氰尿酸為主要成分的含氯消毒劑在醫(yī)療工作中也被廣泛使用。及時了解鮑曼不動桿菌對消毒劑的敏感性變化，對制定和調整消毒對策和醫(yī)院感染控制有重要的意義。
　　目的:
　　了解鮑曼不動桿菌的臨床分布特征、耐藥特性，通過分子分型方法檢測不同來源的鮑曼不動桿菌是否存在同源性，判斷是否存在耐藥菌株的克隆播散，追蹤鮑曼不動桿菌在

5、醫(yī)院交叉感染的可能途徑，監(jiān)測鮑曼不動桿菌的耐消毒劑基因的攜帶情況和對醫(yī)院常用消毒劑的敏感性變化情況，以便制定合理選擇和使用消毒劑的對策，控制鮑曼不動桿菌在醫(yī)院中傳播。
　　方法:
　　收集河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院2012年10月至2013年6月臨床分離的73株多重耐藥鮑曼不動桿菌，排除從同一患者分離的重復菌株，并通過ID32E鑒定。采用K-B瓊脂紙片擴散法測定多重耐藥鮑曼不動桿菌對臨床常用抗菌藥物的敏感性;用腸桿菌科基因間重復序

6、列-聚合酶鏈反應(ERIC-PCR)對菌株進行同源性分析;采用聚合酶鏈反應(PCR)檢測菌株耐消毒劑基因（qacE△1-sul1）的攜帶情況。采用肉湯稀釋法檢測三氯異氰尿酸對菌株的最小抑菌濃度(MIC)。
　　結果:
　　73株多重耐藥鮑曼不動桿菌除對頭孢哌酮/舒巴坦耐藥性較低(43.84％)外，其對其它12種臨床常用抗菌藥物的耐藥性普遍較強，其耐藥率分別為:哌拉西林97.26％、頭孢他啶95.89％、亞胺培南94.52％、

7、頭孢哌酮97.26％、頭孢曲松95.89％、慶大霉素94.52％、環(huán)丙沙星95.89％、阿米卡星94.52％、哌拉西林/他唑巴坦95.89％、頭孢吡肟95.89％、左氧氟沙星86.30％、甲氧芐啶/磺胺甲嗯唑95.89％。
　　73株多重耐藥鮑曼不動桿菌經(jīng)ERIC-PCR分型分為8個基因型，分別用A、B、C、D、E、F、G、H表示，其中A型31株，B型15株，C型12株，D型8株，E型3株，F(xiàn)型2株，G和H型各為1株。 A型和B型

8、為主要的流行株，分布在多個不同的科室。ICU病房分離的菌株存在6個基因型，分別是A(10株)、B（7株）、C（5株）、D（5株）、F(1株)、G（1株）;骨科系統(tǒng)病區(qū)存在A（10株）B（4株）C（5株）D(1株)4個基因型;急診科有A（3株），B(1株)、C(1株)、D（1株）、E（1株）5個基因型;內科系統(tǒng)病區(qū)發(fā)現(xiàn)有A型5株，B型3株，C、E、F、H各1株;外科系統(tǒng)病區(qū)發(fā)現(xiàn)A型3株，D、E各1株。對ICU環(huán)境生物學物體表面監(jiān)測，共分離

9、出4株鮑曼不動桿菌，菌株編號分別為9(A型)、10（B型）、12(D型鍵盤)和13(B型鍵盤)，其中9號和10號菌株來自于不同患者的床旁，12號和13號來自于護理站電腦鍵盤。
　　73株多重耐藥鮑曼不動桿菌中，37株菌攜帶qacE△1-sul1基因，陽性率為50.68％，其中ICU有12株，骨科系統(tǒng)有14株，急診科5株，內科系統(tǒng)有3株，外科系統(tǒng)有3株。73株多重耐藥鮑曼不動中含氯消毒劑MIC值為250mg/L的菌株有7株，MIC值

10、為300mg/L的菌株有28株，MIC值為400mg/L的菌株有25株，MIC值為500mg/L的菌株有13株。
　　結論:
　　1臨床分離的多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥情況嚴重。
　　2臨床分離的多重耐藥鮑曼不動桿菌存在多個基因型。
　　3多重耐藥鮑曼不動桿菌存在時間和空間的聚集性。
　　4臨床分離的多重耐藥鮑曼不動桿菌耐消毒劑基因攜帶率較高。
　　5盡管分離的多重耐藥鮑曼不動桿菌攜帶耐消毒劑基因，但臨