鮑曼不動桿菌耐碳青霉烯類抗生素耐藥機制的研究.pdf

1、目的：
　　 由耐碳青霉烯類多重耐藥鮑曼不動桿菌引起的嚴重院內(nèi)感染近年呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢，使臨床醫(yī)生面臨巨大的挑戰(zhàn)，對其耐藥機制的研究成為了一個重要的課題。本研究調查分析某綜合性醫(yī)院2007年1月到2009年12月間鮑曼不動桿菌在臨床送檢標本中的分離趨勢及其對抗菌藥物的耐藥性，指導醫(yī)生合理使用抗菌藥物，以克服或減少細菌耐藥性的出現(xiàn)或傳播。同時，采用分子生物學方法研究鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類抗生素耐藥在醫(yī)院的主要耐藥機制。

2、　　 方法：
　　 1、從某綜合性醫(yī)院(三級甲等)實驗室數(shù)據(jù)庫中篩選出2007年1月到2009年12月3年臨床標本所分離的鮑曼不動桿菌詳細資料，應用WHONET5.4軟件對其分離情況及藥敏進行比對分析。
　　 2、隨機選取2008年1月～2009年9月期間分離的100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動桿菌(非重復菌株)，應用VITEK-2compact全自動微生物鑒定藥敏系統(tǒng)對其進行鑒定和藥敏試驗，并用紙片擴散法(K-B法)進行

3、藥敏確認試驗，結果判讀采用相應年份的CLSI(美國臨床實驗室標準化協(xié)會)標準執(zhí)行。
　　 3、對100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動桿菌利用VITEK-2Compact的高級專家系統(tǒng)軟件(AESTM)進行耐藥機制(產(chǎn)碳青霉烯酶)初篩。
　　 4、設計合成針對blaIMP、blaVIM、blaSIM-1blaOXA-23和blaOXA-24的引物序列，采用PCR方法對100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動桿菌進行特異性擴增，并對PCR產(chǎn)

4、物進行DNA測序分析。
　　 結果：
　　 1、某綜合性醫(yī)院在2007～2009年3年間分離的鮑曼不動桿菌分別為238株、317株和403株，占同年病原菌分離率的4.820％、5.5％、7.2％，該細菌分離率呈現(xiàn)上升趨勢；在14種常規(guī)測試的抗菌藥物中，該菌對IMP的耐藥率最低，分別為10.3％、24.5％、43.0％，其次是TZP(16.3％、28.6％、44.4％)和FEP(24.8％、37.4％、47.8％)，對其余

5、11種抗菌藥物耐藥率維持在一個較高的水平，耐藥率在45.1％～75.7％之間。
　　 2、隨機篩選的100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動桿菌主要分離自痰標本(80％)，病區(qū)分布則主要集中在ICU(62％)，其次是高干保健病區(qū)(13％)；該類細菌對7類抗假單胞菌的抗生素耐藥譜顯示，多重耐藥菌株占98％，泛耐藥菌株占72％，對13種常規(guī)測試抗菌藥物的耐藥率都在85％以上。
　　 3、VITEK-2Compact的高級專家軟件系統(tǒng)(

6、AESTM)顯示為產(chǎn)碳青霉烯酶的100株碳青霉烯類耐藥鮑曼不動桿菌，經(jīng)PCR特異性擴增，結果顯示：用引物blaIMP、blaVIM、blaSIM-1、和blaOXA-24均未檢測到陽性結果，提示在本次研究的鮑曼不動桿菌中，不產(chǎn)生IMP、VIM、SIM-1和OXA-24型碳青霉烯酶；有79株鮑曼不動桿菌用引物blaOXA-23擴增出陽性條帶(目的片段長度為1058bp)，并且分別選取2008年及2009年各1株細菌的PCR產(chǎn)物進行測序，與

7、GenBank上已知序列比對，顯示均為產(chǎn)OXA-23型碳青霉烯酶鮑曼不動桿菌。
　　 結論：
　　 1、某綜合性醫(yī)院2007～2009年3年間流行的鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物耐藥情況嚴重，其中對亞胺培南的耐藥率維持在較高水平，且呈逐年上升的趨勢。
　　 2、碳青霉烯類耐藥鮑曼不動桿菌對13種常規(guī)試驗的抗菌藥物耐藥嚴重，耐藥率均在85％以上，其中多重耐藥菌株為98％，泛耐株達到72％。
　　 3、該醫(yī)院碳青