碳青霉烯類(lèi)耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌碳青霉烯酶與整合子的研究.pdf

1、目的：
　　了解淮北市人民醫(yī)院臨床患者標(biāo)本中分離的鮑曼不動(dòng)桿菌分布特點(diǎn)及其對(duì)臨床上常用抗菌藥物的耐藥情況；了解對(duì)碳青霉烯類(lèi)抗菌藥物耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌碳青霉烯酶與整合子產(chǎn)生及攜帶情況；探討鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率與整合子的產(chǎn)生是否有相關(guān)性，為臨床合理使用抗菌藥物提供指導(dǎo)和幫助。
　　材料與方法：
　　收集淮北市人民醫(yī)院2013年1月至2013年12月臨床標(biāo)本中分離的鮑曼不動(dòng)桿菌共65株，分析細(xì)菌的感染分布特點(diǎn)；采用紙片擴(kuò)散法

2、(Kirby-Bauer法）檢測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南、米諾環(huán)素等15種抗菌藥物的耐藥情況。使用EDTA雙紙片協(xié)同法初步篩查耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌金屬酶產(chǎn)生情況；用改良Hodge試驗(yàn)初步檢測(cè)碳青霉烯酶。采用PCR方法擴(kuò)增碳青霉烯酶基因型(OXA-23，KPC-2，IMP-1等)，并對(duì)碳青霉烯酶全編碼基因進(jìn)行克隆測(cè)序分析。轉(zhuǎn)移結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)碳青霉烯酶耐藥基因的轉(zhuǎn)移性，質(zhì)粒提取并進(jìn)行D

3、NA分析，對(duì)碳青霉烯酶耐藥基因進(jìn)行定位。PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物序列分析鮑曼不動(dòng)桿菌整合子的分布情況，并分析整合子與細(xì)菌耐藥表型的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　從標(biāo)本類(lèi)型特點(diǎn)上看，以呼吸道標(biāo)本最多(73.8%)，其次為外科傷口分泌物(10.8%)，其它類(lèi)型標(biāo)本只占少數(shù)。從感染科室情況來(lái)看，重癥監(jiān)護(hù)病房最多(47.7%)，其次為神經(jīng)內(nèi)科(23.1%)和呼吸內(nèi)科(18.5%)，存在明顯的科室集中趨勢(shì)。
　　65株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)哌拉西林

4、的耐藥率為93.8%，頭孢他啶和頭孢吡肟的耐藥率分別為72.3%、73.8%，頭孢哌酮/舒巴坦為41.5%，米諾環(huán)素為7.7%，亞胺培南和美羅培南分別為47.7%和52.3%。根據(jù)藥敏試驗(yàn)篩選出的34株碳青霉烯類(lèi)耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌，其改良Hodge試驗(yàn)結(jié)果有28株為陽(yáng)性，EDTA協(xié)同試驗(yàn)結(jié)果全部陰性。
　　改良Hodge試驗(yàn)陽(yáng)性的菌株其基因擴(kuò)增結(jié)果為：OXA-23陽(yáng)性25株，KPC-2陽(yáng)性13株。陽(yáng)性菌株全編碼基因TA克隆測(cè)序結(jié)果表

5、明：OXA-23和KPC-2均未見(jiàn)突變。
　　34株碳青霉烯類(lèi)耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌中I類(lèi)整合子陽(yáng)性率為61.8%(21/34)，碳青霉烯類(lèi)敏感菌株陽(yáng)性率為16.1%(5/31)。比較I類(lèi)整合子陽(yáng)性株與陰性株耐藥表型發(fā)現(xiàn)，除了對(duì)哌拉西林耐藥率均較高，兩者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，對(duì)其余14種檢測(cè)的抗菌藥物耐藥率均有顯著性差異(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　鮑曼不動(dòng)桿菌可以從呼吸道、外傷傷口等多個(gè)部位中分離出，但以下呼吸道

6、感染為主；淮北人民醫(yī)院臨床分離鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥率最低的是米諾環(huán)素，其次是頭孢哌酮／舒巴坦，并且對(duì)碳青霉烯類(lèi)的耐藥率維持在相當(dāng)高的水平；淮北人民醫(yī)院鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物主要耐藥機(jī)制之一是產(chǎn)OXA-23型和KPC-2型碳青霉烯酶，未檢測(cè)到OXA-24型、OXA-58型碳青霉烯酶和IMP、VIM型金屬酶；碳青霉烯類(lèi)耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌 I類(lèi)整合子陽(yáng)性率明顯高于碳青霉烯類(lèi)敏感株；除哌拉西林外，I類(lèi)整合子陽(yáng)性菌株與陰性菌株對(duì)其余