5年間鮑曼不動桿菌產(chǎn)碳青霉烯酶特性與耐藥相關性研究.pdf

1、目的： 1.了解溫州醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院2002～2006年鮑曼不動桿菌的臨床分布及耐藥情況，為臨床藥物選擇提供依據(jù)。 2.研究2002～2006年每年3～5月臨床分離鮑曼不動桿菌碳青霉烯酶的分布與變遷情況及其與碳青霉烯類抗生素耐藥的關系。 方法： 1.回顧性調(diào)查2002年1月～2006年12月間臨床分離鮑曼不動桿菌的臨床分布情況，瓊脂擴散法檢測鮑曼不動桿菌對頭孢他啶、頭孢曲松、阿米卡星和環(huán)丙沙星的耐藥性，

2、瓊脂稀釋法檢測業(yè)胺培南的最低抑菌濃度(MIC)。 2.挑選2002～2006年每年3～5月共174株鮑曼不動桿菌，瓊脂稀釋法檢測鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美洛培南的MIC值。PCR檢測碳青霉烯酶基因(IMP、VIM、OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXh-58)和插入序列ISAbal，對OXA-51陽性菌株進行測序確定基因業(yè)型。粗提酶三維水解試驗比較OXA-23、OXA-51對亞胺培南的水解能力。接合傳遞試驗探討OXA-

3、23、OXA-51基因定位(染色體或質(zhì)粒)。 結(jié)果： 1.5年間分離的865株鮑曼不動桿菌主要來源于呼吸道標本，占75.7％(655/865)，且主要集中于監(jiān)護病房和神經(jīng)外科等科室；鮑曼不動桿菌對臨床常用抗菌藥物的耐藥性逐年上升，亞胺培南敏感株的MIC值也呈逐年上升趨勢。 2.2002～2006年每年3～5月問臨床分離的鮑曼不動桿菌，對業(yè)胺培南的耐藥率分別為0％(0/20)、2.6％(1/38)、0％(0/36)

4、、27.9％(12/43)和59.5％(22/37)，對美洛培南的耐藥率分別為0％(0/20)、2.6％(1/38)、0％(0/36)、20.9％(9/43)和54.1％(20/37)，呈逐年上升趨勢，尤其是06年對業(yè)胺培南、美洛培南耐藥的鮑曼不動桿菌達到近60.0％。 3.IMP、VIM、OXA-24和OXA-58均未檢測到，檢測到OXA-23陽性31株占17.8％(31/174)，OXA-51陽性122株占70.1％(122

5、/174)，31株OXA-23陽性菌株OXA-51也全陽性，OXA-23的陽性率從2002年的0％上升到2006年的59.5％，OXA-51的陽性率從2002年的30％上升到2006年的86.5％。31株OXA-23陽性菌對亞胺培南和美洛培南的MIC值都≥16μg/ml，僅OXA-51陽性的菌(91株)除3株對亞胺培南的MIC值等于16μg/ml外，其余88株都≤8μg/ml。OXA-23陽性菌耐藥性明顯高于僅OXA-51陽性菌株。OX

6、A-51陽性菌和陰性菌對業(yè)胺培南和美洛培南的MIC值分布也存在差異，OXA-51陽性菌對亞胺培南和美羅培南的MIC值普遍高于OXA-51陰性(P＜0.005)。 4.122株OXA-51樣陽性菌株經(jīng)測序、Blast比對后，共有15個不同的業(yè)型，OXA-66型占81.1％(99/122)，其他基因型占18.9％(23/122)，包括OXA-64、OXA-65、OXA-68、OXA-98、OXA-106、OXA-121、OXA-12

7、3、OXA-124、OXA-126、OXA-127各1株，OXA-120、OXA-125各2株，OXA-122和OXA-69分別為3株和5株，其中OXA-120～OXA-127為本次研究發(fā)現(xiàn)的8個OXA-51群新基因型，對應的核苷酸序列已在GenBank登陸，登陸號為EU255289～EU255296。將僅OXA-51樣陽性菌(91株)分為OXA-66和非OXA-66兩組比較，OXA-66的菌株對頭孢他啶、頭孢曲松、環(huán)丙沙星、阿米卡星的

8、耐藥率均大于90％，明顯高于非OXA-66組，OXA-66組對亞胺培南和美羅培南對的MIC值也高于非OXA-66組(P＜0.05)。 5.0XA-51陽性的122株菌，PCR檢測了插入序列ISAbal，ISAbal陽性103株占84.4％(103/122)，98.1％(101/103)的菌株對亞胺培南MIC值≥lug/ml，19株ISAbal陰性菌對亞胺培南、美洛培南MIC值均≤0.5ug/ml。68株OXA-66的菌株都檢測到

9、了ISAbal而23株非BOXA-66的菌株僅有4株檢測到了ISAbal。 6.粗提酶三維水解試驗顯示，OXA-23陽性菌粗提酶能明顯水解亞胺南，OXA-51陽性菌粗提酶對亞胺培南的水解不明顯。 7.0XA-23和OXA-51陽性菌接合傳遞試驗均未見接合子生長，接合試驗陰性。 結(jié)論： 1.5年來，鮑曼不動桿菌的感染率和耐藥性明顯升高，且有繼續(xù)上升趨勢。 2.鮑曼不動桿菌中OXA-23、OXA-51

10、的檢出率及其對碳青霉烯類抗生素的耐藥性均呈上升趨勢；產(chǎn)OXA-23型β-內(nèi)酰胺酶是本院鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類抗生素耐藥的重要原因。 3.本院OXA-51樣基因種類豐富，OXA-66為本院分離鮑曼不動桿菌產(chǎn)OXA-51樣碳青霉烯酶的主要基因型，發(fā)現(xiàn)了8個新的OXA-51樣碳青霉烯酶基因。 4.OXA-51群中的OXA-66介導的碳青霉烯類低水平耐藥，這一作用可能是通過插入序列ISAba/插入OXA-66基因上游啟動子序列