相變型超聲分子探針物理殺傷肝癌細胞的實驗研究.pdf

1、第一部分硫酸腦苷脂修飾的液-氣相轉變型超聲分子探針的制備及相變研究
　　目的：制備一種新型納米級超聲分子探針—硫酸腦苷脂修飾的包裹全氟戊烷的脂質納米粒，研究其熱致相變及聲致相變效果。
　　方法：采用薄膜分散法制備硫酸腦苷脂修飾的包裹全氟戊烷（PFP）的脂質納米粒（SL-NP），使用光學顯微鏡觀察其形態(tài)、大小、分布等物理特征；采用激光粒度儀測SL-NP的粒徑；在加熱板加熱情況下使用光學顯微鏡觀察SL-NP液-氣相轉變情況，用低

2、強度聚焦超聲（LIFU）輻照SL-NP乳液后使用超聲診斷儀觀察SL-NP的聲致相變（ADV）情況。
　　結果：制備的硫酸腦苷脂修飾的包裹PFP的脂質納米粒，其外觀成白色乳液，圓球形，密度高，大小均一，分散均勻，不成團聚集，平均粒徑約為(182.7±63.8)nm；當加熱板溫度升至44.5℃時，SL-NP開始出現(xiàn)液-氣相轉變，隨著溫度繼續(xù)升高，相變納米粒體積繼續(xù)增大，直至破裂，同時出現(xiàn)新的相變納米粒并逐漸增大。經(jīng)LIFU輻照后，普通

3、二維超聲及超聲造影模式下均顯示脂質納米?；芈曒^輻照前明顯增強。
　　結論：成功制備納米級超聲分子探針—硫酸腦苷脂修飾的包裹PFP的脂質納米粒，并在加熱及超聲輻照下可發(fā)生液-氣相轉變。
　　第二部分相變型超聲分子探針物理殺傷肝癌細胞的實驗研究
　　目的：探討硫酸腦苷脂修飾的包裹PFP的脂質納米粒聯(lián)合低強度聚焦超聲對肝癌HepG2細胞的殺傷作用。
　　方法：采用薄膜分散法制備不含硫酸腦苷脂的包裹PFP的脂質納米粒（N

4、SL-NP）和SL-NP；使用倒置熒光顯微鏡觀察SL-NP及NSL-NP與肝癌HepG2細胞結合情況，將肝癌細胞分為靶向組（SL-NP組）、非靶向組（NSL-NP組）、空白對照組（不含L-NP組），使用LIFU（參數(shù)3W，2min）分別對各組進行輻照，爾后使用流式細胞術檢測各組細胞凋亡情況，CCK-8檢測各組細胞存活情況。
　　結果：制備的NSL-NP外觀成白色乳液,圓球形，密度高，大小均一，分散均勻，不成團聚集，與SL-NP相比

5、物理特性相似；倒置熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)靶向組中SL-NP與肝癌HepG2細胞緊密結合，非靶向組中NSL-NP很少與肝癌HepG2細胞結合；經(jīng)LIFU處理后，靶向組肝癌細胞凋亡率最高，為（95.86±1.96）％,存活率最低，為（49.21±3.04）%，與其他組比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論：硫酸腦苷脂修飾的包裹PFP的脂質納米粒聯(lián)合低強度聚焦超聲可促進肝癌HepG2細胞死亡，抑制其增殖，有望成為治療肝癌的一種