RGD修飾納米鐵探針對(duì)肝癌細(xì)胞的分子影像學(xué)研究及能譜CT評(píng)價(jià)肝癌TACE術(shù)后療效的價(jià)值.pdf

1、第一部分、RGD修飾納米鐵探針對(duì)肝癌細(xì)胞的分子影像學(xué)研究
　　目的：
　　合成與高表達(dá)整合素αvβ3的人肝癌HepG2細(xì)胞特異性結(jié)合的靶向納米探針RGD-PEG-VSOP，利用磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging，MRI）評(píng)估該分子探針在體外、體內(nèi)對(duì)肝癌細(xì)胞和肝癌模型的靶向成像效果。
　　方法：
　　通過(guò)免疫蛋白印跡法（Western Blot），以Hela細(xì)胞（陽(yáng)性對(duì)照）和293T細(xì)

2、胞（陰性對(duì)照）為對(duì)照，檢測(cè)人肝癌HepG2細(xì)胞表面是否存在整合素αvβ3；通過(guò)合成靶向整合素αvβ3的納米探針RGD-PEG-VSOP，運(yùn)用1H NMR、FTIR、TEM和TGA等對(duì)該探針進(jìn)行表征分析，采用MTT細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)該材料的生物安全性；在細(xì)胞水平的離體實(shí)驗(yàn)，以PEG-VSOP納米顆粒為對(duì)照，判定RGD-PEG-VSOP納米顆粒對(duì)于整合素αvβ3的靶向性；在體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，取帶瘤裸鼠9只，隨機(jī)分為3組，每組3只，分別注射RGD

3、-PEG-VSOP、PEG-RGD及Gd-DTPA，比較三組MRI成像效果，并研究鐵納米顆粒探針在體內(nèi)器官與組織的分布及病理普魯士藍(lán)染色，電鏡檢測(cè)尋找移植瘤內(nèi)的RGD-PEG-VSOP納米顆粒。
　　結(jié)果：
　　Western Blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人肝癌HepG2細(xì)胞和Hela細(xì)胞的電泳結(jié)果存在70KD條帶，而293T細(xì)胞無(wú)此條帶，證實(shí)人肝癌HepG2細(xì)胞表面存在整合素αvβ3；RGD-PEG-VSOP納米顆粒的水動(dòng)力直徑約21

4、2.5 nm，TEM顯示納米顆粒無(wú)簇狀聚集，其r1弛豫率為1.37mM-1S-1；人肝癌HepG2細(xì)胞MRI成像顯示靶向材料（RGD-PEG-VSOP）處理后細(xì)胞的T1WI成像的信號(hào)值要高于非靶向材料（PEG-VSOP），RGD-PEG-VSOP與PEG-VSOP兩組信號(hào)值之間的差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；尾靜脈注射靶向材料RGD-PEG-VSOP后15min開始腫瘤信號(hào)值明顯增高，于注射后60min達(dá)到峰值，在90min腫瘤信

5、號(hào)下降，而對(duì)照組PEG-VSOP僅在注射后60min腫瘤部位信號(hào)顯示出輕度升高。注射RGD-PEG-VSOP、PEG-RGD的裸鼠兩組間腫瘤信號(hào)值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　人肝癌HepG2細(xì)胞表面存在整合素αvβ3。納米探針RGD-PEG-VSOP具有MRI T1正向增強(qiáng)作用。細(xì)胞水平顯示RGD-PEG-VSOP納米顆粒具有靶向整合素αvβ3的特性。體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示RGD-PEG-VSOP納米顆?？?/p>

6、以用于MRI顯像。
　　第二部分、能譜CT評(píng)價(jià)肝癌TACE術(shù)后療效的價(jià)值
　　目的：
　　肝癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）患者行經(jīng)皮肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)（Transcatheter Arterial Chemoembolization，TACE）后療效的科學(xué)評(píng)價(jià)是指導(dǎo)臨床個(gè)體化治療的重要環(huán)節(jié)，常規(guī)計(jì)算機(jī)斷層掃描（Computed Tomograph，CT）和磁共振成像（Magnetic Re

7、sonance Imaging，MRI）是評(píng)價(jià)TACE療效常用的方法，但是二者在評(píng)價(jià)殘留病灶和碘油沉積方面都有各自缺陷，我們擬采用能譜CT對(duì)肝癌TACE術(shù)后殘留及療效進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　方法：
　　2013年11月—2014年11月共10例患者TACE術(shù)前病理確診為肝癌，失去手術(shù)機(jī)會(huì)的肝癌行TACE術(shù)治療后，在一周內(nèi)接受動(dòng)態(tài)增強(qiáng)MRI7503T檢查、雙期能譜CT750 HD和數(shù)字減影血管造影（Digital subtractio

8、n angiography，DSA）檢查。得到患者的常規(guī)MRI及DWI和動(dòng)態(tài)增強(qiáng)檢查，常規(guī)CT圖像，能譜CT的碘基圖像、單能量圖像及DSA圖像。以DSA、MRI和臨床隨訪6個(gè)月后證實(shí)的殘癌灶為標(biāo)準(zhǔn)，比較DSA、MRI、常規(guī)CT圖像、能譜CT的碘基圖像和單能量圖像發(fā)現(xiàn)HCC殘留癌灶的能力，測(cè)量三種CT圖像病灶的對(duì)比噪聲比（Contrast to Noise ratio，CNR），采用t檢驗(yàn)比較是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果：

9、　　在10例HCC患者中經(jīng)DSA、MRI及隨訪6個(gè)月共證實(shí)存在30個(gè)HCC殘留病灶。MRI、能譜CT的碘基圖像和單能量圖像均發(fā)現(xiàn)了所有病灶，而DSA和常規(guī)CT圖像發(fā)現(xiàn)29個(gè)病灶。各種影像學(xué)方法發(fā)現(xiàn)HCC殘留癌灶的能力之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。動(dòng)脈期能譜CT碘基圖像的CNR值為（13.7±3.7），明顯高于單能量圖像（4.2±1.2）及常規(guī)CT圖像（3.8±1.4）。能譜CT碘基圖像與單能量圖像以及能譜CT碘基圖像與常規(guī)CT圖像的殘癌灶CNR的差