mLIGHT基因轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞疫苗防治肝癌動物實驗研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文mLIGHT基因轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞疫苗防治肝癌動物實驗研究姓名：汪勇申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：殷曉煜20080518中山大學(xué)碩士學(xué)位論文 m L I G H T 基因轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞疫苗防治肝癌動物實驗研究子、黏附分子基因；③編碼特定外源蛋白的基因；④抑癌基因與凋亡基因；⑤腫瘤相關(guān)抗原基因；⑥多基因聯(lián)合修飾。尋找能夠誘導(dǎo)高特異性抗腫瘤免疫反應(yīng)、低正常組織損害的外源基因是當(dāng)前基因修飾腫瘤疫苗研究者的主要目標(biāo)。由M

2、a 嘶等在1 9 9 8 年發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子超家族( T N F S F ) 成員之一的L I G H T 正是這樣一種基因。人源L I G H T ( h L I G H T ) 是含有2 4 0 個氨基酸殘基的I I 型跨膜糖蛋白，分子量為2 9 l ( D 。鼠源L I G H T ( m L I G H T ) 是由2 3 9 個氨基酸殘基組成的蛋白，分子量為2 6 ．3 4 k D ，其氨基酸序列與h L I G H T 具

3、有7 7 ％同源性。L I G H T 正常情況下只在活化的淋巴細(xì)胞、N K 細(xì)胞、未成熟D C 上表達。目前的研究表明L I G H T 誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫主要與其兩種膜受體H 、，E M 及L T B R 的作用有關(guān)： ( 1 ) L I G H T 與淋巴細(xì)胞表面的H V E M 受體結(jié)合后能夠通過提供淋巴細(xì)胞增殖所需共刺激信號以及誘導(dǎo)產(chǎn)生ⅣF ．小G M ．C S F 等細(xì)胞因子的方式活化C D 8 + T 淋巴細(xì)胞；( 2 )

4、L I G H T 與腫瘤間質(zhì)細(xì)胞表達的L T B R 結(jié)合能夠刺激間質(zhì)細(xì)胞釋放I L - 6 、C C L 2 1 等一系列細(xì)胞因子、趨化因子，促進C D 8 + T 淋巴細(xì)胞的活化和遷移。鑒于L I G H T 與其受體結(jié)合后能產(chǎn)生一系列重要的免疫刺激作用，已有作者探討L I G H T 基因轉(zhuǎn)染肥大細(xì)胞瘤P 8 1 5 細(xì)胞、纖維肉瘤A 9 1 0 4 H d 細(xì)胞、結(jié)腸癌M C ．3 8 細(xì)胞等，并證明它們可在體內(nèi)誘導(dǎo)特異性抗腫

5、瘤免疫，抑制腫瘤的生長。我們既往已成功通過基因轉(zhuǎn)染途徑構(gòu)建了穩(wěn)定表達m L I G H T 基因的肝癌細(xì)胞，并證明了表達m L I G H T 基因的肝癌細(xì)胞株在體內(nèi)生長受到明顯抑制，提示L I G H T 基因在腫瘤細(xì)胞的表達有助于機體產(chǎn)生特異性抗腫瘤免疫，從而抑制腫瘤生長。本實驗以滅活的轉(zhuǎn)染I l 兒I G H T 基因的肝癌細(xì)胞為腫瘤疫苗，采用C 5 7 B L ／6 小鼠皮下肝癌移植瘤進一步探討其在預(yù)防與治療肝癌方面的作用。第一