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1、該實(shí)驗(yàn)在以往研究的基礎(chǔ)上,采用免疫組化與分子雜交方法結(jié)合分子生物學(xué)和分子病理學(xué)等研究手段,從多種角度探討hsp70在肝癌的發(fā)生機(jī)制中的作用及在肝癌基固治療方面的可行性.(1)運(yùn)用免疫組化與原位雜交技術(shù)檢測(cè)了HSP70及hsp70 mRNA在原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)情況.(2)成功構(gòu)建了逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體pLXSN-hsp70,并應(yīng)用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染方法,對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2進(jìn)行有效基因轉(zhuǎn)移,采用細(xì)胞原位雜交、免疫熒光等方法進(jìn)行mRNA
2、及蛋白水平的分析,證實(shí)在人肝癌細(xì)胞系HepG2中表達(dá)了外源目的基固hsp70.(3)在體外細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)下,結(jié)合流式細(xì)胞漢、TUNEL和電鏡等檢測(cè)技術(shù),研究了hsp70對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞周期的影響,并檢測(cè)了轉(zhuǎn)染hsp70后HepG2細(xì)胞中多種基因產(chǎn)物的表達(dá)情況.綜上所述,我們認(rèn)為,hsp70可能參與了肝癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程,對(duì)hsp70的進(jìn)一步深入研究,有助于闡明HCC發(fā)病機(jī)制,對(duì)于探討hsp70在腫瘤基因治療中的應(yīng)用價(jià)值具有深遠(yuǎn)的意義
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