AZD8055對人肝癌細胞系HepG2的影響及作用機制的研究.pdf

1、目的:肝癌是最常見的惡性腫瘤之一，在我國屬于高發(fā)病，mTOR信號通路在許多腫瘤的發(fā)展中至關重要。AZD8055是新型mTOR激酶抑制劑，對mTOR活性具有很強的抑制作用。本文旨在研究AZD8055對人肝癌細胞系HepG2增殖和凋亡的作用，并初步探討其作用機制。
　　方法:
　　1、體外培養(yǎng)人肝癌細胞株HepG2，采用MTT、流式細胞術及TUNEL染色檢測藥物作用不同時間對細胞增殖、細胞周期及細胞凋亡情況的影響，光學顯微鏡直接

2、觀察藥物處理24h后細胞形態(tài)學變化。
　　2、采用免疫印跡實驗(WB)檢測細胞內PI3K/Akt/mTOR通路中S6K和Akt的磷酸化水平，采用Real-time PCR技術檢測細胞內侵襲相關的重要因子MMP2、MMP9的表達情況。
　　結果:
　　1、在體外細胞實驗中，AZD8055（10nM）作用不同時間后，人肝癌細胞的增殖被顯著抑制，且抑制程度與作用時間呈正相關(P＜0.05)。藥物處理24h后HepG2細胞密度

3、明顯降低，可見明顯的攣縮、凋亡。G0/G1期細胞周期阻滯并且細胞凋亡明顯增加。
　　2、藥物作用不同時間后，MMP2和MMP9的表達逐漸下調，PI3K/Akt/mTOR通路中S6K和Akt的磷酸化水平降低，并且這種作用呈時間依賴性。
　　結論:
　　1、在體外，AZD8055可抑制人肝癌細胞的生長，阻滯細胞周期于G0/G1期并誘導細胞凋亡。
　　2、MMP2，MMP9與腫瘤侵襲轉移相關，AZD8055可能通過降低