螺旋藻多糖對肝癌細胞影響的實驗研究.pdf

1、目的：探討不同劑量螺旋藻多糖(polysaccharide from Spirulina platensis，PSP)作用于體外培養(yǎng)的人肝癌細胞株BEL7404，通過抑制其增殖、誘導(dǎo)細胞凋亡，從分子水平上探討其抗癌的可能機制，為其進一步的開發(fā)利用提供實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)。 方法：采用體外細胞培養(yǎng)技術(shù)，光鏡觀察形態(tài)學(xué)變化，流式細胞術(shù)PI法檢測PSP對BEL7404細胞毒性；流式細胞儀TUNEL法檢測PSP誘導(dǎo)BEL7404細胞的凋亡

2、情況；免疫細胞化學(xué)法檢測PSP處理人肝癌BEL7404細胞后，Bax、Bcl-2、Apaf-1蛋白的表達情況；應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測細胞Caspase-3的活化程度。 結(jié)果：①300μg/ml～100μg/ml螺旋藻多糖對BEL7404細胞有殺傷作用，PSP與細胞抑制之間具有劑量依賴性。②倒置顯微鏡觀察：濃度≥300μg/ml，BEL7404細胞胞質(zhì)混濁，細胞多呈圓形，體積縮小，折光性差，貼壁性能減弱，細胞克隆生長狀態(tài)受到破壞而散開

3、，并出現(xiàn)大量細胞碎片及懸浮、脫落的細胞。③流式TUNEL法檢測300μg/ml、50μg/ml PSP作用24h，BEL7404細胞凋亡率分別為(20.7±8.1)％，(22.3±8.3)％。④免疫細胞化學(xué)結(jié)果顯示PSP使BEL7404細胞Bax、Apaf-1蛋白表達升高，Bcl-2蛋白表達下降。⑤流式細胞術(shù)檢測Caspase-3活性結(jié)果表明，隨著螺旋藻多糖濃度的增加，Caspase-3明顯活化，并且濃度越高越明顯。 結(jié)論：①P