ROS誘導(dǎo)HepG2肝癌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)理研究.pdf

1、該課題是基于該實(shí)驗(yàn)室前期工作中,發(fā)現(xiàn)不同劑量活性氧在細(xì)胞中發(fā)揮不同的作用,尤其中等劑量ROS(50-400μmol·L<'-1>)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡;同時,抗氧化劑對放化療所致腫瘤細(xì)胞凋亡具有抑制作用,表明活性氧在腫瘤細(xì)胞凋亡中具信號調(diào)控作用.因此設(shè)計該課題,以進(jìn)一步觀察不同劑量ROS在誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡過程中可能的調(diào)控途徑、對細(xì)胞凋亡相關(guān)因子的主要調(diào)控作用及各因子相互關(guān)系.該課題以人HepG<,2>肝臟腫瘤細(xì)胞株為研究對象,通過給予不同劑

2、量H<,2>O<,2>觀察細(xì)胞凋亡發(fā)生情況,氧化損傷情況,細(xì)胞內(nèi)環(huán)境變化及相關(guān)蛋白表達(dá)情況以及劑量效應(yīng)關(guān)系,藉此研究活性氧誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)理.研究結(jié)果提示,一定劑量的H<,2>O<,2>雖無直接的細(xì)胞膜氧化損傷的形態(tài)學(xué)與DNA改變,但流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果進(jìn)行推測,其損傷作用主要是表現(xiàn)為活性氧調(diào)控凋亡的信號級聯(lián)反應(yīng),而最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡發(fā)生;pH結(jié)果的起伏及低劑量組突變型P53的反常表達(dá)提示ROS可能通過多種途徑或方式調(diào)控相關(guān)因子逐步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凋亡