細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞靶向殺傷胃癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞靶向殺傷胃癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名：劉超申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師：毛偉征20090526A b s t r a c tO b j e c t i v e ：T oi n v e s t i g a t e t h ep o s s i b i l i t yo f t h e c y t o k i n e —i n d u c e dk i l l e rc e l l s t a

2、 r g e t i n gg a s t r i cc a n c e ra n d t h el e t h a le f f e c t t og a s t r i cc a n c e r ，i n c l u d i n gt h e m o l e c u l em e c h a n i s mi n v o l v e di nt h ep r o c e s s ．M e t h o d s ：C u l t u r

3、 e t h e g a s t r i cc a n c e r c e l l sS G C ··7 9 0 1 a n d t h e c y t o k i n e —- i n d u c e dk i l l e rc e l l s i n v i t r o ，G a s t r i c c a n c e l “ c e l l sS G C - 7 9 0 1 w e r e i n j e c

4、t e d s u b c u t a n e o u s l y i n t o t h ei n g n i n a o fn u d e m i c e ，g a s t r i c c a n c e r _ n u d e m i c e m o d e l W a s e s t a b l i s h e d ．G a s t r i cc a n c e r - b e a r i n gm i c e w e r ed

5、 i v i d e dr a n d o m l yi n t o c y t o k i n e —i n d u c e d k i l l e r c e l l sg r o u p a n df i b r o b l a s t sg r o u p ，f i v e i ne a c hg r o u p ，( n = 5 ) ，M a r k e d t h ec y t o k i n e - i n d u c e

6、 dk i l l e rc e l l sa n d t h e f i b r o b l a s t s H F L - 1 w i t h f l u o r e s c e n c e d y e S P - D i I ，t h e y w e r e i n j e c t e ds u b c u t a n e o u s l y i n t o t h e o p p o s i t e s i d e o fi n

7、 g u i n ao fi m p l a n t a t i o n n e o p i a s m a ．G a s t r i cc a n c e r - b e a r i n gm i c ew e r e k i l l e da f t e r t e n d a y s ，T o o k o u t o f t h et u m o r t i s s u e 、t h ei n j e c t i o ns i t

8、 u s 、l i v e r 、s p l e e n a n d l u n g ．A d j a c e n ts e c t i o n sw e r e d i f f e r e n t l yp r o d u c e df r o z e n s e c t i o n sa n ds t a i n e dw i t hH & E ，a n d o b s e r v e d t h ec y t o k i

9、n e ．i n d u c e d k i l l e rc e l l sd i s t r i b u t i o ni nt h eg a s t r i c c a n c e r - b e a r i n gm i c e i nv i v ou n d e r f l u o r e s c e n c e m i c r o s c o p e ．U s i n gf i b r o b l a s ta st h e

10、c o n t r 0 1 ．E s t a b l i s h e dg a s t r i cc a n c e v n u d em i c e m o d e lb y t h e s a m e w a y ，t h e s e a n i m a l sw e r ed i v i d e dr a n d o m l yi n t o t h ec y t o k i n e - i n d u c e d k i l l

11、 e r c e l l s g r o u pa n df i b r o b l a s t s c o n t r o lg r o u p ，s i x i n e a c hg r o u p ，( ，F(xiàn) 6 ) ，t h e c y t o k i n e —i n d u c e d k i l l e r c e l l s w e r e i n j e c t e ds u b c u t a n e o u s l

12、 yi n t o t h eo p p o s i t es i d eo f i n g u i n a o f i m p l a n t a t i o nn e o p l a s m a ；f i b r o b l a s t sw e r ei n j e c t e d t ot h ec o n t r o lg r o u p ．M e a s u r e dt h e l o n ga n d s h o r t

13、d i a m e t e r o f t h et u m o r ，t oo b t a i nt h et u m o r ' sa p p r o x i m a t i o nv o l u m e sa n d t h e r a t i oo f c u r b i n gc a r c i n o m a ．E x e c u t e dt h e m i c ei n t h ef o u r t e e n

14、t h d a y ，s f i c e d t h e t u m o r t i s s u ei n t op a t h o l o g i c a ls e c t i o n ，o b s e r v e dt h e n e c r o s i sa r e a si n t h et u m o r s ．T a k et h ec y t o k i n e —i n d u c e dk i l l e r c e

15、l l so f t h e d i f f e r e n tc u l t u r e dd a y s ( t h e 0 、s e v e n 、f o u r t e e nd a y s ) ，t h e e x p r e s s i o no f t h e a c t i v a t e df o r m a c c e p t o rN K G 2 Di n t h ec y t o k i n e - i n d

16、u c e dk i l l e r c e l l sw a sd e t e r m i n e db yR T —P C Rm e t h o d ．T h ee x p r e s s i o no f M I C A i ng a s t r i cc a n c e r c e l l s7 9 0 1 、8 0 3 、c o l o n c a r c i n o m a c e l ll i n eH T - 2 9a

17、n d f i b r o b l a s tW a s d e t e r m i n e d b y R T —P C R m e t h o d ．R e s u l t s ：( 1 ) T h e c y t o k i n e ．i n d u c e d k i l l e r c e l l s m a r k e d w i t h t h e d y e w e r ec o n c e n t r a t e dm

18、 a i n l ya tt h et u m o r l o c a t i o ni nt h eg a s t r i cc a n c e r - b e a r i n gm i c ei n v i v oa f t e rt e n d a y s ，t h ed i s t r i b u t i o no f t h ec y t o k i n e ．i n d u c e dk i l l e rc e l l s

19、 i nt h et u m o rh a s s i g n i f i c a n td i f f e r e n c ec o m p a r e d w i t h t h a ti nt h ei n j e c t i o n s R u s 、l i v e r 、s p l e e na n d l u n g ( P < O ．0 1 ) ；t h ef i b r o b l a s t w e r ea l

20、 t o g e t h e rn o t f o u n d e di n t h e t u m o r 、f i v e r 、s p l e e na n dl u n g i n t h ef i b r o b l a s tt e a m ，b u t “c o n c e n t r a t e dm a i n l yi n t h ei n j e c t i o n s i t u s ，t h ed i s t