紅曲霉-白樺茸雙向固體發(fā)酵研究及菌質(zhì)的藥效學(xué)考察.pdf

1、雙向固體發(fā)酵是以藥用真菌為發(fā)酵菌株，以具有活性成分的中藥材或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與中草藥的混合物作為藥性基質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵的方式。在發(fā)酵過(guò)程中，藥性基質(zhì)為真菌的生長(zhǎng)代謝提供營(yíng)養(yǎng)成分，真菌代謝所產(chǎn)的酶又反作用于基質(zhì)改變其組織、成分，從而達(dá)到增強(qiáng)藥效、產(chǎn)生新的性味功能以及減少原藥材毒性的作用。所得菌質(zhì)中藥用真菌與次級(jí)代謝產(chǎn)物無(wú)需分離，二者協(xié)同發(fā)揮藥效。
　　雙向發(fā)酵的產(chǎn)物“菌質(zhì)”即藥材和藥用真菌菌絲體的混合物，多項(xiàng)研究證實(shí)它通常比單一真菌或藥性基質(zhì)本身

2、或兩者簡(jiǎn)單相加有更好的藥效。紅曲霉和白樺茸在藥理活性上具有一致性，白樺茸多糖主要成分是β-葡聚糖和少量雜多糖，雜多糖由葡萄糖和少量其它單糖(如木糖)等組成；白樺茸多糖的藥理作用主要有增強(qiáng)免疫、抗腫瘤、抗氧化、降血糖和降血脂等；紅曲霉發(fā)酵產(chǎn)物有多種活性物質(zhì)，其中 Monacolin K有抗腫瘤和降血脂作用，紅曲多糖也有增強(qiáng)免疫、抗腫瘤和抗氧化等活性。此外紅曲霉生長(zhǎng)代謝過(guò)程中能產(chǎn)生淀粉酶、葡萄糖苷酶、纖維素酶等酶系，具有對(duì)中草藥活性成分進(jìn)行

3、轉(zhuǎn)化、修飾及產(chǎn)生新的活性物質(zhì)的潛力。謝炎福等[1]利用紅曲霉與何首烏進(jìn)行雙向液體發(fā)酵降低了結(jié)合蒽醌的含量，并促進(jìn)了紅曲霉的生長(zhǎng)及其次級(jí)代謝產(chǎn)物Monacolin K的積累；宋艷秋等[2]利用紅曲霉對(duì)中藥葛根進(jìn)行雙向固體發(fā)酵提高了其主要有效成分葛根素含量。因此，本文以紅曲霉為發(fā)酵菌種建立紅曲霉-白樺茸雙向固體發(fā)酵體系，以期二者優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，并利用紅曲霉的生物轉(zhuǎn)化作用來(lái)提高白樺茸β-葡聚糖的含量，使所得藥性菌質(zhì)具有更好的藥效。
　　本文的

4、主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
　　(1)建立紅曲霉-白樺茸雙向固體發(fā)酵體系，根據(jù)紅曲霉的生長(zhǎng)狀況、折干率、消耗率以及Monacolin K含量的變化,考察紅曲霉-白樺茸體系進(jìn)行雙向發(fā)酵的適應(yīng)性。結(jié)果表明：紅曲霉-白樺茸雙向固體發(fā)酵體系適應(yīng)性良好，且在白樺茸-大米粉混合基質(zhì)上發(fā)酵效果更佳，菌絲體的生長(zhǎng)狀況、折干率和消耗率均達(dá)到適應(yīng)性要求，發(fā)酵14 d后菌質(zhì)中含有一定量的Monacolin K，發(fā)酵體系存在物質(zhì)轉(zhuǎn)化的可能，因此該發(fā)酵組合合

5、理可行。
　　(2)以菌質(zhì)生長(zhǎng)情況、菌質(zhì)中Monacolin K含量和β-葡聚糖含量為指標(biāo)，采用單因素試驗(yàn)考察PH、溫度、初始含水量、裝料量、接種量、發(fā)酵周期和補(bǔ)水量對(duì)紅曲霉-白樺茸雙向發(fā)酵結(jié)果的影響，并通過(guò)正交試驗(yàn)進(jìn)一步確定該發(fā)酵體系提高M(jìn)onacolin K和β-葡聚糖含量的最佳工藝。結(jié)果顯示：在發(fā)酵溫度28℃、基質(zhì)配比1:1、裝料20 g、PH值為4.0、初始含水量90％、接種量40%、發(fā)酵12 d、每隔4 d補(bǔ)水并攪拌一次

6、條件下發(fā)酵效果最佳，在此條件下發(fā)酵所得菌質(zhì)β-葡聚糖和Monacolin K含量分別為1.97%和2.09 mg/g。
　　(3)以剛果紅法所測(cè)菌質(zhì)β-葡聚糖含量為指標(biāo)，采用單因素試驗(yàn)分別考察料液比、提取溫度、提取時(shí)間和提取次數(shù)對(duì)β-葡聚糖提取率的影響，并通過(guò)正交試驗(yàn)來(lái)確定β-葡聚糖的最佳提取工藝。結(jié)果顯示：料液比1:20、提取溫度為80℃、提取時(shí)間為2.5 h、提取次數(shù)為2次時(shí)提取效果最佳，在此條件下測(cè)得菌質(zhì)β-葡聚糖提取率為2