固定化紅曲霉發(fā)酵水溶性色素的研究.pdf

1、本課題通過紫外誘變篩選出一株高產(chǎn)水溶性色素的紅曲霉菌株，將其固定化并對(duì)固定化與發(fā)酵方法進(jìn)行優(yōu)化，在最優(yōu)條件下液態(tài)培養(yǎng)紅曲霉固定化細(xì)胞，從而提高紅曲水溶性色素的產(chǎn)量，以適應(yīng)現(xiàn)代化食品加工業(yè)的發(fā)展趨勢(shì)。 首先平板分離實(shí)驗(yàn)室保留的紅曲霉菌株S和風(fēng)城老窖酒廠提供的紅曲霉菌株F，各獲得5株菌株，比較它們的產(chǎn)色素水平，選擇鳳城老窖菌株F4為出發(fā)菌株，紫外誘變2min，獲得的F4018菌株水溶性色素產(chǎn)量最高，達(dá)到24.25U/mL，比出發(fā)菌株

2、F4產(chǎn)色素能力提高了67％。然后對(duì)紅曲霉菌株F4018進(jìn)行性能指標(biāo)的測(cè)定，確定其最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃，最適pH值為4～6。 在上述研究結(jié)果的基礎(chǔ)上對(duì)紅曲霉菌株F4018液態(tài)培養(yǎng)基配方進(jìn)行研究，根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果和方差分析，確定了紅曲霉菌株F4018液態(tài)發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基配方：大米粉8％，NH<,4>NO<,3> 0.4％，KH<,2>PO<,4>0.2％，MgSO<,4> 0.1％，ZnSO<,4> 0.02％，MnSO<,4

3、> 0.04％，調(diào)pH為5.5。在最優(yōu)條件下對(duì)紅曲霉菌株F4018進(jìn)行液態(tài)培養(yǎng)，確定其對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期是第三天。 分別選用海藻酸鈉、聚乙烯醇、卡拉膠和殼聚糖為固定化載體，對(duì)紅曲霉菌株F4018進(jìn)行包埋，分析比較這四種固定化顆粒的特性，最后選擇海藻酸鈣包埋法作為紅曲霉菌株F4018的固定化方法。并對(duì)其固定化與發(fā)酵條件進(jìn)行單因素研究，通過正交試驗(yàn)確定制備與發(fā)酵固定化紅曲霉F4018細(xì)胞的最優(yōu)條件為：采用5.0％海藻酸鈉與紅曲霉F4018菌

4、株(1×10<'9>個(gè)/mL)等體積混合，將5mL海藻酸鈉——孢子懸液滴入到4％CaCl<,2>溶液中，制成紅曲霉F4018海藻酸鈣膠珠。用500mL的三角瓶裝100mL培養(yǎng)基，接入8mL的海藻酸鈉凝膠固定化細(xì)胞，搖瓶轉(zhuǎn)速為180r/min，30℃下避光培養(yǎng)。 在優(yōu)化條件下液態(tài)培養(yǎng)紅曲霉F4018的固定化細(xì)胞和游離細(xì)胞，比較兩者的發(fā)酵特性，發(fā)現(xiàn)固定化紅曲霉F4018細(xì)胞不僅具有與游離細(xì)胞相似的前期發(fā)酵過程和色價(jià)最值，而且還表現(xiàn)出