內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的TXNIP在實(shí)驗(yàn)性SAH后早期腦損傷發(fā)生機(jī)制的研究.pdf

1、目的：作為體內(nèi)重要的促氧化蛋白，硫氧還蛋白相互作用蛋白（Thioredoxin-interacting protein，TXNIP）可以在多種應(yīng)激狀態(tài)下導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和炎癥發(fā)生。課題組前期研究表明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（Endoplasmic eticulum stress，ER stress）介導(dǎo)的腦細(xì)胞死亡是加重蛛網(wǎng)膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）后早期腦損傷（early brain injury， EBI）的

2、重要機(jī)制。近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，ER stress可以在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)TXNIP的表達(dá)。因此本研究擬對(duì)ER stress和TXNIP進(jìn)行干預(yù)，以期闡明ER stress-TXNIP信號(hào)通路參與SAH后EBI的發(fā)生過(guò)程。
　　方法：采用SD雄性大鼠血管內(nèi)穿刺法建立SAH模型，檢測(cè)TXNIP及下游因子SAH后72h內(nèi)動(dòng)態(tài)變化；采用TXNIP siRNA、TXNIP抑制劑Resveratrol、PERK抑制劑GSK2656157、IRE

3、1α抑制劑STF-083010對(duì) TXNIP及 ER stress感受體進(jìn)行干預(yù)。Western blot檢測(cè)干預(yù)前后TXNIP及通路相關(guān)因子表達(dá)變化，三維熒光檢測(cè)腦細(xì)胞TXNIP定位，熒光TUNEL檢測(cè)TXNIP在凋亡細(xì)胞中的定位、干預(yù)前后凋亡細(xì)胞數(shù)量變化情況，同時(shí)評(píng)估死亡率、SAH評(píng)分、神經(jīng)功能評(píng)分、腦水腫、血腦屏障通透性變化情況。
　　結(jié)果： SAH后 TXNIP及下游相關(guān)因子在出血早期即出現(xiàn)增高（0.729±0.548，P

4、<0.05）。熒光共聚焦發(fā)現(xiàn)TXNIP在神經(jīng)元、小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)，熒光TUNEL發(fā)現(xiàn)TXNIP與凋亡細(xì)胞出現(xiàn)共定位。對(duì) TXNIP及 ER stress干預(yù)后，TXNIP的表達(dá)被顯著抑制(P<0.05)，并伴隨下游凋亡因子和炎癥因子釋放減少(P<0.05)，SAH大鼠預(yù)后得到改善。
　　結(jié)論：作為體內(nèi)重要的命運(yùn)調(diào)控細(xì)胞器，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與多種死亡調(diào)節(jié)機(jī)制。本研究證實(shí)ER stress介導(dǎo)的TXNIP表達(dá)能明顯加重細(xì)胞凋亡發(fā)生