28090.hil15sa雙功能融合蛋白中試工藝研究

1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文hIL15SA雙功能融合蛋白中試工藝研究姓名：余宏盛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：高基民20100501溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文34KD大小位置。2hIL15一SA融合蛋白發(fā)酵條件優(yōu)化通過發(fā)酵條件的優(yōu)化，在3％的接種量，pH值為72，發(fā)酵培養(yǎng)基為209／L蛋白胨，409／L酵母抽提物，49／L磷酸二氫鈉，129／L磷酸氫二鈉，39／L硫酸銨，29／L硫酸鎂，4ml／L甘油發(fā)酵條件下一次性可得到濕菌4

2、79／L和包涵體21159／L。3包涵體洗滌，純化復(fù)性洗滌液洗后的包涵體用8M尿素溶解后分別經(jīng)鎳柱層析和陰離子交換柱層析，純化后的目的條帶經(jīng)SDSPAGE和免疫印跡分析鑒定。條帶經(jīng)銀氨染色及經(jīng)凝膠掃描儀分析純度為97％，二次純化后目的條帶峰值最高濃度為13m∥ml。純化后的融合蛋白通過梯度尿素透析復(fù)性的方法檢測體外生物學(xué)活性。4細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞錨定實(shí)驗(yàn)取小鼠脾細(xì)胞，體外MTT法檢測發(fā)現(xiàn)不同濃度的hIL15SA與淋巴細(xì)胞成劑量依賴效應(yīng)，