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1、論文研究優(yōu)化了Gln49-PLA2的分離方法,僅采用HitrapSP陽離子交換、Superdex75凝膠過濾層析兩步即從長白山白眉蝮蛇蛇毒中分離出該蛋白。通過添加保護劑,延長了Gln49-PLA2抗凝血酶活性的保存時間;確定了保護劑及保存條件:添加5﹪(w/v)海藻糖,Gln49-PLA2終濃度為0.6mg/ml,-20℃保存14天,活性為原來的80.6﹪,7-14天活性穩(wěn)定。 動物實驗測得其LD50為18.2mg/kg。熱板實
2、驗中,腹腔注射Gln49-PLA2的615小鼠痛閾比空白對照組顯著提高,證明了其鎮(zhèn)痛活性且鎮(zhèn)痛作用呈劑量依賴性;鈉洛酮可有效拮抗Gln49-PLA2的鎮(zhèn)痛活性,說明其鎮(zhèn)痛機理可能與阿片受體有關(guān)。電生理分析,100ug/ml的Gln49-PLA2可降低蟾蜍坐骨神經(jīng)樣本的動作電位和傳導(dǎo)速度,說明其可能會影響神經(jīng)元上一些離子通道的性質(zhì)。 膜片鉗實驗結(jié)果顯示,Gln49-PLA2對SHSY5Y細(xì)胞鈉離子通道無明顯作用,但可減弱鉀離子通道
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