白眉蝮蛇蛇毒類凝血酶的分離純化及酶學表征.pdf

1、蛇毒類凝血酶屬于蛇毒絲氨酸蛋白酶家族。它可以將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。 由它所產(chǎn)生的纖維蛋白側(cè)鏈不發(fā)生交聯(lián)，容易被纖溶系統(tǒng)所降解，所以它具有降低血液粘度的功能。也因此類凝血酶在血栓的防治，心肌梗死方面有很廣泛的應用。本實驗運用陽離子交換，凝膠過濾和陰離子交換層析技術(shù)從長白山白眉蝮蛇蛇毒中分離出兩種具有纖維蛋白原降解活性的酶：酶Ⅰ和酶Ⅱ。兩種酶都具有精氨酸酯酶活性和纖維蛋白原凝結(jié)活性。這兩種酶的精氨酸酯酶活性可被苯甲基磺酰氟(P

2、MSF)，苯甲脒(Benzamidine)和L-苯甲磺酰苯丙氨酰氯甲酮(TPCK)所抑制，而不被乙二胺四乙酸(EDTA)抑制。酶Ⅰ可釋放少量的血纖肽A，不釋放血纖肽B。而酶Ⅱ除釋放血纖肽A外，還釋放少量血纖肽B。在與纖維蛋白原降解實驗中發(fā)現(xiàn)，酶Ⅰ和酶Ⅱ都能首先降解纖維蛋白原a鏈，后降解纖維蛋白原B鏈，酶Ⅰ降解纖維蛋白原的速度比酶Ⅱ快。酶Ⅱ在與纖維蛋白原共浴24小時后發(fā)現(xiàn)其能降解γ鏈。SDS-PAGE電泳顯示兩種酶都為單肽鏈，酶Ⅰ和酶Ⅱ的