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1、中南大學(xué)博士學(xué)位論文NS398作用人宮頸癌的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究姓名:李新國(guó)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專(zhuān)業(yè):外科學(xué)指導(dǎo)教師:李宜雄20060501細(xì)胞增殖的抑制作用可能是通過(guò)改變細(xì)胞周期來(lái)實(shí)現(xiàn)的。相差顯微鏡下觀察卡鉑干預(yù)后細(xì)胞呈凋亡改變,提示卡鉑對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞增殖的抑制作用可能是通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)的。2)200lamol/LNS398作用Hela細(xì)胞48d時(shí)后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn),NS398處理組凋亡指數(shù)為343士002%,對(duì)照組凋亡
2、指數(shù)為148士003%。兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p005)。而卡鉑處理組凋亡指數(shù)為932士002%,兩組比較有統(tǒng)計(jì)意義(p005)3)提取NS398(200uhD作用48d時(shí)組及對(duì)照組Hela細(xì)胞總蛋白質(zhì)進(jìn)行二維凝膠電泳,經(jīng)考馬斯亮藍(lán)染色,對(duì)照組、NS一398組分別檢測(cè)到約(985ztz45)及(897士57)個(gè)蛋白點(diǎn)。NS一398組表達(dá)量下調(diào)的差異蛋白點(diǎn)為25個(gè),表達(dá)量上調(diào)蛋白點(diǎn)48個(gè),只在NS398組出現(xiàn)的蛋白點(diǎn)12個(gè),NS398組消
3、失的蛋白點(diǎn)15個(gè)。選取2個(gè)表達(dá)量下調(diào)、14個(gè)表達(dá)量上調(diào)的差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行MOLDITOF質(zhì)譜鑒定。質(zhì)譜鑒定獲得14張肽質(zhì)指紋圖。經(jīng)MSDB數(shù)據(jù)庫(kù)搜索后其中10個(gè)蛋白點(diǎn)被初步鑒定。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)Mascot軟件檢索MSDB數(shù)據(jù)庫(kù)和Profound軟件檢索MSDB數(shù)據(jù)庫(kù)初步鑒定的蛋白質(zhì)點(diǎn)有10個(gè),即3磷酸甘油醛脫氫酶(D一3一Phosphoglyceratedehydrogenase),結(jié)蛋白(desmin),角蛋白一4(keratin4),伊默
4、菌素(emerin),波形蛋I蘭t(vimentin),膜聯(lián)蛋白V(Annexinv),膜聯(lián)蛋白A3(AnnexinA3),巰基特異性還原酶(probablethiol—specificreductase),AB029576NID,另外一個(gè)為假想的蛋白片段(Hypotheticalproteinfragment)結(jié)論:①選擇性COX2抑制劑NS398對(duì)宮頸癌細(xì)胞的增殖具有抑制作用。②NS一398作用48小時(shí)宮頸癌細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)率無(wú)明顯變
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