IgA腎病患者外周血內(nèi)皮祖細胞的檢測及意義.pdf

1、背景：
　　 IgA腎病(IgA nephropathy,IgAN)是指一組以IgA或IgA為主的免疫球蛋白及補體等復合物在。腎小球系膜區(qū)或毛細血管袢沉積的原發(fā)性腎小球疾病,在我國原發(fā)性腎小球腎炎中,發(fā)病率為30%-40%,是導致慢性腎衰竭的首位病因,而且該病臨床特征和病理多樣化,疾病進程不一。10年內(nèi)約有10%～20%IgAN患者進入終末期腎病(end-stagerenaldisease,ESRD)。
　　 迄今為止I

2、gAN的發(fā)病機制還未能完全闡明,大量動物實驗及臨床觀察都證明本病系免疫復合物介導的腎小球腎炎,有多種機制參與了其發(fā)病。根據(jù)系膜增生性腎小球腎炎的病理特點,系膜細胞與毛細血管袢內(nèi)皮直接相連接無基底膜的特點,所以系膜基質(zhì)與系膜細胞的損傷,增生,免疫炎癥反應發(fā)生,炎癥介質(zhì)釋放等,會直接導致毛細血管內(nèi)皮細胞的缺血,缺氧,壞死。
　　 血管內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cell,EPC)是血管內(nèi)皮細胞(endo

3、thelial cells,EC)的前體細胞。生理條件下,循環(huán)系統(tǒng)中EPCs含量極少,局部的血管損傷、缺血、燒傷、創(chuàng)傷及細胞因子等均能刺激EPCs從骨髓中動員進入血液循環(huán)系統(tǒng),并歸巢到損傷的微血管處并分化為成熟的內(nèi)皮細胞維持微血管的完整性。推測EPCs的數(shù)量及功能在IgA腎病發(fā)生發(fā)展中起決定性作用。
　　 目的：
　　 研究IgA腎病患者外周血內(nèi)皮祖細胞(EPCs)的數(shù)量、增殖能力、集落形成能力及外周血vWF含量的變化。

4、
　　 方法：
　　 1、標本來源:中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院腎內(nèi)科病房2011年6月至2011年12月住院患者中,經(jīng)腎活檢病理診斷為原發(fā)性IgA腎病,微小病變,膜性腎病且未經(jīng)治療患者的靜脈血10ml,正常對照組來源于體檢中心的健康人群。標本來源者均排除吸煙、近期外傷、手術史、皮膚潰瘍、糖尿病、心血管、銀屑病,類風濕,惡性腫瘤,血液系統(tǒng)疾病等影響EPCs的相關因素。取得患者本人知情同意。
　　 2、流式細胞儀檢測外

5、周血EPCs的數(shù)量。密度離心法分離外周血中EPCs并進行培養(yǎng),觀察細胞形態(tài)及集落形成能力,并行免疫熒光鑒定內(nèi)皮祖細胞。噻唑蘭(MTT)法檢測EPCs的增殖能力。ELISA檢測外周血中人血管性血友病因子(vWF)的濃度判定內(nèi)皮細胞損傷的程度。
　　 3、實驗分組
　　 (1)正常對照組(5例):健康體檢中心來源的正常人;
　　 (2)原發(fā)性IgA腎病組(30例):經(jīng)腎活檢病理確認為原發(fā)性IgA腎病LeeⅠ-Ⅴ級且未

6、經(jīng)治療患者。
　　 (3)疾病對照組為膜性腎病(7例)組及微小病變(7例)組。
　　 結(jié)果：
　　 1、流式細胞檢測EPCs數(shù)量:各疾病組EPCs數(shù)量減少,與正常對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。
　　 2、各疾病組之間EPCs數(shù)量的比較:微小病變組與膜性腎病組相比,差異無統(tǒng)計學意義,(p＞0.05),IgAN組與微小病變組及膜性腎病組相比,差異均有統(tǒng)計學意義,(p＜0.05)。IgANLeeⅠ

7、-Ⅳ組與IgANLeeⅤ級相比,差異有統(tǒng)計學意義,(p＜0.05)。
　　 3、外周血EPCs數(shù)量與臨床生化指標的關系:檢測患者臨床生化指標顯示胱抑素-C(r=-0.485,p＜0.05)、血尿酸(r=-0.404,p＜0.05)及血肌酐(r=-0.480,p＜0.05)與EPCs數(shù)量呈負性相關,而血IgA水平,血清白蛋白,24h尿蛋白定量,血紅蛋白,尿紅細胞水平等未發(fā)現(xiàn)與EPC水平有關,(p＞0.05)。
　　 4、各

8、組EPCs集落數(shù)比較:各疾病組培養(yǎng)的EPCs集落數(shù)顯著低于正常對照組(P＜0.05);IgAN組低于輕微病變組(P＜0.05),IgAN組與膜性腎病組此相比,差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05),IgANLeeⅠ-Ⅳ級組與IgANLeeⅤ級有統(tǒng)計學意義(p＜.05)。
　　 5、各組細胞增殖能力的比較:與正常對照組相比,疾病組EPCs增殖能力顯著降低(p＜0.05),微小病變病組顯著高于IgAN組(p＜0.01),微小病變病組與膜性

9、。腎病組相比,差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05),IgAN組與膜性腎病組相比,差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.01),IgANLeeⅠ-Ⅳ級組與IgANLeeⅤ級相比,差異有統(tǒng)計學差異(p＜0.01)。
　　 6、各組vWF含量的比較:與正常對照組相比,疾病組vWF含量顯著升高(p＜0.05),IgAN組顯著高于微小病變病組(p＜0.01),微小病變病組與膜性腎病組相比,差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05),IgAN組與膜性腎病組相比,vW

10、F含量顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.01),IgANLeeⅤ級組與IgANLeeⅠ-Ⅳ級相比,vWF含量顯著升高差異有統(tǒng)計學差異(p＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1、IgA腎病組外周血EPCs含量減少,集落形成能力及增值能力較其他病理類型下降明顯,且隨著病變的加重,EPCs的數(shù)量及功能下降更明顯。
　　 2、EPCs的數(shù)量隨著血肌酐,血尿酸及胱抑素-C的升高而逐漸下降。
　　 3、IgA腎病組