姜黃素對(duì)慢性阻塞性肺疾病患者外周血來(lái)源的內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量及功能的影響.pdf

1、背景：
　　慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一種慢性氣道炎癥性疾病,目前在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率和死亡率逐年增加,是當(dāng)今嚴(yán)重的全球性公共衛(wèi)生問(wèn)題。根據(jù)WTO統(tǒng)計(jì)資料顯示,COPD已成為全球第4位死亡原因,預(yù)計(jì)2020年將躍居為全球范圍內(nèi)死亡原因的第3位,僅次于缺血性心臟病及腦血管病,進(jìn)一步加重全球的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。隨著病情的進(jìn)展,COPD患者不僅存在肺功能的逐漸下

2、降,同時(shí)還伴隨著心血管系統(tǒng)疾病,骨質(zhì)疏松,抑郁等合并癥的發(fā)生,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。由于COPD的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,因此深入地探討COPD的發(fā)病機(jī)制,從根本上預(yù)防和治療COPD是當(dāng)今全球的研究熱點(diǎn)。COPD患者早在發(fā)病初期就存在著血管內(nèi)皮功能的受損,內(nèi)皮功能障礙在COPD的發(fā)生及發(fā)展中起著重要作用。內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)作為內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,當(dāng)血管內(nèi)皮受損后可通過(guò)EPCs

3、分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞參與修復(fù)損傷的內(nèi)皮,對(duì)于維持內(nèi)皮功能完整和血管新生具有重要意義。近年來(lái)有研究證實(shí)姜黃素能顯著增加人外周血EPCs的數(shù)量并改善其內(nèi)皮修復(fù)功能,提示姜黃素對(duì)修復(fù)內(nèi)皮損傷具有重要作用。然而,姜黃素對(duì)COPD患者的內(nèi)皮損傷是否具有修復(fù)作用,其可能的作用機(jī)理如何,目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)相關(guān)研究及報(bào)道。
　　目的：
　　觀察不同濃度姜黃素對(duì)COPD患者外周血來(lái)源的EPCs的數(shù)量、增殖功能、一氧化氮(nitric oxide,

4、NO)分泌功能及內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表達(dá)的影響,探討姜黃素對(duì)COPD患者血管內(nèi)皮功能保護(hù)作用的機(jī)制。
　　方法：
　　選擇住院的COPD病人30例,分別抽取外周血15mL,經(jīng)密度梯度離心法獲取各自外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),均分為4組,加入不同濃度姜黃素(0,5,10,15μm

5、ol/L)刺激并誘導(dǎo)其分化為EPCs,熒光雙染色鑒定EPCs后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化收集貼壁的EPCs,再加入各濃度姜黃素,相同條件下培養(yǎng)一定時(shí)間(6,12,24,48h)。采用CCK-8法檢測(cè)EPCs的增殖能力,硝酸還原酶法(Griess法)檢測(cè)NO分泌量,Western Blot法檢測(cè)eNOS蛋白的表達(dá)。結(jié)果
　　與未加入姜黃素的對(duì)照組相比,姜黃素可以促進(jìn)PBMC向EPCs的分化率,從而增加了EPCs的數(shù)量。隨著姜黃素濃度增加,E

6、PCs數(shù)量增加越明顯,當(dāng)姜黃素濃度為15μmol/L時(shí)到達(dá)高峰(P<0.01)。姜黃素也顯著改善了COPD患者EPCs的自身增殖功能及NO分泌功能,呈濃度及時(shí)間依賴關(guān)系,與15μmol/L濃度的姜黃素共培養(yǎng)24h后,EPCs的增殖及NO分泌功能改善最為明顯(P<0.01)。姜黃素刺激后,EPCs的eNOS表達(dá)也顯著上調(diào),且呈濃度依賴關(guān)系,當(dāng)姜黃素濃度為15μmol/L時(shí)上調(diào)最為明顯(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　姜黃素可