2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、目的：研究Protein kinase D2(PKD2)對(duì)腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)挠绊?，為腦膠質(zhì)瘤的治療提供新的靶點(diǎn)。
　　方法：1.應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染PKD2 siRNA及GOLPH3 siRNA后腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中相應(yīng)蛋白表達(dá)情況。2.應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染PKD2siRNA及PKD2 shRNA后腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞核酸干擾特異性和有效性。3.應(yīng)用EDU方法檢測(cè)下調(diào)β-catenin

2、對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖的影響。4.應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)PKD2 shRNA和myc-GOLPH3的共轉(zhuǎn)染體系。5.應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)PKD2 shRNA和myc-GOLPH3的共轉(zhuǎn)染體系對(duì)β-catenin細(xì)胞分布的影響。
　　結(jié)果：1.分別轉(zhuǎn)染PKD2 siRNA和GOLPH3 siRNA48h后可檢測(cè)到PKD2和GOLPH3蛋白水平下調(diào)，提示小干擾構(gòu)建成功。2.與對(duì)照組相比，用siRNA下調(diào)PKD

3、2后GOLPH3的表達(dá)，并且是特異性干擾(P＜0.05);轉(zhuǎn)染PKD2 shRNA48h后可檢測(cè)到PKD2蛋白水平明顯減少(P＜0.05)。3.轉(zhuǎn)染β-catenin siRNA48h后β-catenin蛋白水平明顯減少(P＜0.05)，膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖能力下降(P＜0.05)。4.轉(zhuǎn)染PKD2 shRNA后內(nèi)源性和外源性GOLPH3明顯降低。5.共轉(zhuǎn)PKD2 shRNA和PCS2-GOLPH3過表達(dá)質(zhì)粒后，PKD2 shRNA使β-c

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