GOLPH3調節(jié)EGFR的內吞降解促進人腦膠質瘤細胞增殖機制的作用研究.pdf

1、目的：檢測高爾基磷酸化蛋白3(GOLPH3)的核酸和蛋白水平與腦膠質瘤發(fā)生的相關性；觀察GOLPH3對膠質瘤細胞增殖、凋亡的影響；探索GOLPH3影響膠質瘤增殖的機制，從而為膠質瘤的治療提供新的靶點。
　　方法：(1)采用免疫印跡(WB)檢測GOLPH3在非腫瘤腦組織及腦膠質瘤組織中的表達情況。(2)通過Lipofectamine2000將GOLPH3 siRNA轉染到膠質瘤U251及U87細胞，運用WB方法鑒定GOLPH3 si

2、RNA的干擾效率。(3)分別以流式細胞術和CCK8法檢測下調GOLPH3對膠質瘤細胞凋亡、增殖能力的影響。(4)應用WB、免疫熒光法檢測下調GOLPH3的表達對EGFR的降解、內吞及其下游信號的影響。
　　結果：1.與非腫瘤腦組織相比，GOLPH3在膠質瘤組織中呈高表達(P<0.05)。2.三條目的小干擾轉染48小時后，GOLPH3的蛋白水平均顯著降低(P<0.05)，干擾效果達60％-80%。3.在膠質瘤細胞中，下調GOLPH3

3、的表達能夠增加細胞的凋亡率(P<0.05)和降低細胞增殖率(P<0.05)。4.在膠質瘤細胞中，下調GOLPH3能夠促進EGFR的內吞、降解，并減弱EGFR的活化及其下游AKT信號通路的激活。
　　結論：1.GOLPH3在腦膠質瘤中高表達，表明GOLPH3可能參與人腦膠質瘤的發(fā)生發(fā)展。2.下調GOLPH3表達能夠抑制膠質瘤細胞增殖，促進膠質瘤細胞凋亡。3.GOLPH3對膠質瘤細胞增殖與凋亡的影響可能是通過調節(jié)EGFR的內吞與降解，