2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、目的：研究高爾基磷酸化蛋白3(GOLPH3)對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響，探索EGFR糖基化在其中的作用，為膠質(zhì)瘤的治療提供新的靶點(diǎn)。
　　方法：通過(guò)Lipofectamine2000將針對(duì)GOLPH3基因的siRNA oligo轉(zhuǎn)染到膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞(下調(diào)GOLPH3)：(1)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)及免疫印跡(western-blotting)鑒定GOLPH3的干擾效率。(2)用免疫沉淀(IP)法及l(fā)ectin-

2、blotting法檢測(cè)表皮生長(zhǎng)因子(EGFR)的糖基化水平。(3)蛋白免疫印跡法檢測(cè)EGFR及其活性形式的蛋白表達(dá)情況。(4)RT-PCR法檢測(cè)糖基化轉(zhuǎn)移酶V(GnT-V)在核酸水平的表達(dá)情況。(5)蛋白免疫印跡法檢測(cè)EGFR下游蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：(1)三條目的小干擾轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，GOLPH3的mRNA及蛋白水平均顯著降低(P<0.05)，干擾效果達(dá)60％-80％。(2)下調(diào)GOLPH3后EGFR的糖基化水平明顯降低。

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