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文檔簡(jiǎn)介
1、研究背景與目的:
GOLPH3是近年來(lái)被發(fā)現(xiàn)的一種新的癌基因,目前已經(jīng)證實(shí)GOLPH3的表達(dá)與肝細(xì)胞癌患者的預(yù)后存在密切聯(lián)系,其可作為一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素預(yù)測(cè)肝細(xì)胞癌患者的預(yù)后。有資料表明肝細(xì)胞癌患者對(duì)化療有效率僅為20%-30%,肝癌化療耐藥仍是影響患者預(yù)后的主要障礙[3]。目前,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)于GOLPH3在肝細(xì)胞癌化療中的作用研究甚少,本課題擬研究GOLPH3對(duì)肝細(xì)胞癌細(xì)胞化療藥物敏感性的影響及可能涉及的分子機(jī)制。
2、方法:
應(yīng)用RT-PCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)4株肝細(xì)胞癌細(xì)胞系(Bel-7402、HepG2、Huh-7、LM3)和1株正常肝細(xì)胞系(L0-2)中GOLPH3在mRNA及蛋白水平的表達(dá)情況。采用慢病毒感染技術(shù)構(gòu)建穩(wěn)定干擾的GOLPH3肝細(xì)胞癌細(xì)胞系,檢測(cè)5-FU、Oxaliplatin對(duì)干擾肝細(xì)胞癌細(xì)胞系增殖、凋亡、化療藥物敏感性的影響及其涉及的部分分子機(jī)制。
結(jié)果:
MTS結(jié)果顯示GOLPH
3、3干擾組細(xì)胞應(yīng)用5-FU和Oxaliplatin后,其IC50值均明顯低于對(duì)照組(P<0.05),兩組細(xì)胞活性差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;EdU結(jié)果顯示GOLPH3干擾組細(xì)胞應(yīng)用5-FU和Oxaliplatin后,其增殖比例明顯低于對(duì)照組(P<0.05),兩組細(xì)胞增殖差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示GOLPH3干擾組應(yīng)用5-FU和Oxaliplatin后,其凋亡比例明顯高于對(duì)照組(P<0.05),兩組細(xì)胞凋亡能力差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。干擾后
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