PKD2在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)情況及其作用.pdf

1、研究背景:PKD作為細(xì)胞內(nèi)廣泛表達(dá)的蛋白激酶，其在腫瘤中的研究尚處于起步階段。目前研究證明，PKD在細(xì)胞內(nèi)的激活主要受G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)調(diào)控。GPCR在受到胞外信號刺激時(shí)，產(chǎn)生第二信使DAG。DAG通過激活PKC或者直接作用使PKD激活。磷酸化的PKD由胞膜轉(zhuǎn)移至核內(nèi)，參與有絲分裂信號級聯(lián)，同時(shí)與β-catenin、HDAC、ERK、NF-κB、JNK等信號分子產(chǎn)生廣泛的Crosstalk。某些激素或細(xì)胞因子如胃泌素、血管加壓素

2、等通過激活PKD，進(jìn)而影響腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等生物學(xué)行為。
　　PKD在細(xì)胞增殖、遷移等生物學(xué)行為的調(diào)控上起到了非常重要的作用。PKD通過結(jié)合JNK和ERK1/2，調(diào)控JNK、ERK及c-Jun的磷酸化和活性，進(jìn)而刺激細(xì)胞增殖;PKD還可以通過促進(jìn)整合素募集，影響腫瘤細(xì)胞侵襲;并且，PKD還參與到調(diào)節(jié)應(yīng)激和疾病的狀態(tài)。
　　PKD分為三個(gè)亞型，PKD1，PKD2和PKD3。PKD的不同亞型在不同的惡性腫瘤中作用各異。

3、PKD1是研究較為廣泛的亞型，在乳腺癌、前列腺癌等腫瘤中的研究發(fā)現(xiàn)，PKD1可以抑制腫瘤增殖遷移，并參與維持上皮細(xì)胞表型。部分研究認(rèn)為PKD2和PKD3可以起到促進(jìn)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的作用。PKD2與PKD1分子結(jié)構(gòu)部分相似，但在其激活途徑及對下游通路的影響不完全相同。在不同的惡性腫瘤中，PKD1和PKD2的過表達(dá)或表達(dá)缺失能引起不同的效用。
　　研究目的:PKD2與肺癌的發(fā)生及惡性程度是否相關(guān)，PKD2如何影響細(xì)胞的生物學(xué)特性，通過哪

4、些通路發(fā)揮作用，以及PKD2作為肺癌治療新靶點(diǎn)是否可行。
　　研究方法:1.取33例肺癌患者的腫瘤組織(T)和正常組織(N)做RT-PCR，得到的結(jié)果通過配對t檢驗(yàn)證實(shí)PKD2的表達(dá)在腫瘤與正常組織中是否有差異。
　　2.對這33例患者的臨床資料進(jìn)行分析，驗(yàn)證PKD2能否作為預(yù)后相關(guān)因素，以及PKD2的表達(dá)與患者的臨床病理資料是否相關(guān)。
　　3.已知PKD2在部分腫瘤細(xì)胞系（如A549）中為高表達(dá)，以此細(xì)胞系進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，

5、驗(yàn)證轉(zhuǎn)染PKD2siRNA后細(xì)胞的活性。
　　4.利用高表達(dá)PKD2細(xì)胞系(A549)驗(yàn)證PKD2對細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)。
　　5.利用westernblot驗(yàn)證轉(zhuǎn)染組與正常組中可能與PKD2相關(guān)的通路中關(guān)鍵因子的激活情況，驗(yàn)證PKD2可能的作用通路。
　　研究結(jié)果:1.PKD2在正常組織與腫瘤組織中的表達(dá)無明顯差異，且PKD2表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)無明顯相關(guān)，同時(shí)，PKD2的表達(dá)與患者生存時(shí)間無明顯關(guān)聯(lián)。2.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)

6、，PKD2轉(zhuǎn)染敲除可以明顯抑制細(xì)胞活性及增殖。3.westernblot證實(shí)PKD2可以影響p-ERK、p-S6K1、p-S6、p-Akt的活化情況。
　　結(jié)論:1.PKD2在腫瘤與正常組織中表達(dá)無明顯差異，并且PKD2的表達(dá)和生存時(shí)間無明顯聯(lián)系。2.敲除PKD2可以誘發(fā)細(xì)胞增殖下降。3.PKD2可能通過調(diào)節(jié)P70、ERK、AKT、S6的激活影響腫瘤細(xì)胞的增殖等特性。4.PKD2在腫瘤發(fā)展中可能起到促進(jìn)腫瘤的作用。
　　意義