產(chǎn)前細(xì)菌人工染色體標(biāo)記——磁珠分離法的臨床性能研究.pdf

1、目的：
　　 產(chǎn)前BoB檢測(cè)是一種新的用于快速產(chǎn)前診斷的方法，通過(guò)標(biāo)記目標(biāo)區(qū)域位點(diǎn)，使用已設(shè)計(jì)好的探針檢測(cè)提取自人體標(biāo)本（羊水、絨毛、臍帶血）中的DNA樣本來(lái)診斷染色體非整倍體異常（13、18、21、X和Y染色體）和10種微缺失綜合征。本研究通過(guò)與傳統(tǒng)的G顯帶法核型分析結(jié)果比較來(lái)評(píng)估BoBs方法的準(zhǔn)確性、敏感性、特異性及其快速產(chǎn)前診斷中的預(yù)測(cè)價(jià)值來(lái)探討這種新的檢測(cè)方法在臨床實(shí)踐中應(yīng)用的可行性。
　　 方法：
　　

2、 本次試驗(yàn)分為兩部分，兩部分試驗(yàn)均采用自身配對(duì)設(shè)計(jì)方案：
　　 第一部分（回顧性研究）：從北京協(xié)和醫(yī)院選取細(xì)胞遺傳室選取20例已知染色體核型結(jié)果的羊水標(biāo)本（包括染色體核型異常和正常標(biāo)本）和1例來(lái)自于DNA細(xì)胞系的陽(yáng)性標(biāo)本（DiGeorge1綜合征）進(jìn)行BoBs方法驗(yàn)證試驗(yàn)，對(duì)比BoBs試驗(yàn)結(jié)果與已知的核型分析結(jié)果，驗(yàn)證BoBs方法的準(zhǔn)確性。
　　 第二部分（前瞻性研究）：對(duì)2011年10月-2012年3月間于北京協(xié)和醫(yī)院

3、接受羊膜腔穿刺行產(chǎn)前診斷的孕婦同時(shí)進(jìn)行BoBs方法來(lái)檢測(cè)非整倍體異常和微缺失綜合征，并通過(guò)BoBsoft軟件分析檢測(cè)結(jié)果。比較BoBs方法與傳統(tǒng)的G顯帶法核型分析方法的結(jié)果，來(lái)評(píng)估這種新方法敏感性、特異性及準(zhǔn)確性。
　　 結(jié)果：
　　 1．在本研究的回顧性試驗(yàn)部分，經(jīng)檢測(cè)提取自羊水的DNA樣本有3例濃度<4ng/μ1，因此共有18例標(biāo)本通過(guò)BoBs方法進(jìn)行檢測(cè)，共檢測(cè)出1例18-_體，2例21-三體，1例DiGeorge

4、1綜合征，與已知的核型分析結(jié)果一致，證明了該方法的準(zhǔn)確性、特異性及敏感性。
　　 2．在前瞻性試驗(yàn)部分：①運(yùn)用BoBs方法共檢測(cè)來(lái)源于新鮮羊水的DNA標(biāo)本390例，檢驗(yàn)結(jié)果經(jīng)過(guò)質(zhì)量控制評(píng)估有377例樣本檢測(cè)合格，此方法的檢測(cè)成功率為96.7％(377/390)。共檢測(cè)出18-三體1例、21-三體7例、15號(hào)染色體異常1例；②通過(guò)與檢測(cè)樣本的傳統(tǒng)核型分析方法對(duì)比，BoBs方法共漏診2例染色體異常（包括1例18-三體、1例嵌合體45

5、X[3]/46XX[17]。BoBs方法檢測(cè)出的15號(hào)染色體異常樣本的G顯帶法核型分析結(jié)果診斷21-三體，將此標(biāo)本用ArrayCGH方法驗(yàn)證后證實(shí)BoBs方法檢測(cè)正確（為15染色體長(zhǎng)臂片段的致畸性重復(fù)）；③經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析得出，與傳統(tǒng)的G顯帶核型分析方法相比，BoBs方法的陽(yáng)性率、靈敏度、假陽(yáng)性率、特異性、準(zhǔn)確性分別為2.4％、81.8％、0、100％、99.5％。
　　 結(jié)論：
　　 1．BoBs方法與傳統(tǒng)G顯帶核型分析方法

6、有良好的相關(guān)性。
　　 2．BoBs方法是一種用于檢測(cè)染色體非整倍體異常和10種微缺失綜合征的快速、可靠、易操作的方法。
　　 3．BoBs方法具有高敏感性、特異性及準(zhǔn)確性，可取代FISH、QF-PCR等快速產(chǎn)前診斷方法。
　　 4．BoBs方法結(jié)合傳統(tǒng)的G顯帶核型分析方法可提高產(chǎn)前診斷的準(zhǔn)確性、多樣性。
　　 5．目前該方法尚不能用于嵌合體異常、本產(chǎn)品沒(méi)有覆蓋的染色體區(qū)域的擴(kuò)增和缺失、點(diǎn)突變、平衡性重排