原發(fā)性腎病綜合征患兒外周血單個(gè)核細(xì)胞MDR1及P-gp170的表達(dá).pdf

1、目的：檢測(cè)原發(fā)性腎病綜合征(PNS)患兒不同時(shí)間點(diǎn)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)多耐藥基因MDR1及其基因產(chǎn)物P-糖蛋白170(P-gp170)的表達(dá)情況，探討MDR1及P-gp170在PNS患兒糖皮質(zhì)激素(GC)耐藥中的作用及介導(dǎo)耐藥的可能機(jī)制。 方法：選擇本院住院的PNS患兒30例為研究對(duì)象，根據(jù)隨訪結(jié)果分成兩組：激素耐藥型腎病綜合征(SRNS)和激素敏感型腎病綜合征(SSNS)，各15名。10名健康體檢兒童作為正常對(duì)照組(c

2、ontrol)。分三個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集外周血標(biāo)本：(1)發(fā)病初未用GC時(shí)；(2)足量GC治療4周后：(3)病情緩解停用GC二月后或病情不緩解但潑尼松減量至每天小于0.5mg/kg。進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：①逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)PNS患兒不同時(shí)間點(diǎn)PBMC MDR1mRNA的表達(dá)。②流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)PNS患兒不同時(shí)間點(diǎn)PBMC P-gp170的表達(dá)。 結(jié)果：(1) control組兒童和PNS患兒PBMC均有MDR1

3、mRNA及P-gp170的表達(dá)。(2) PBMC MDR1mRNA與P-gp170的表達(dá)呈高度正相關(guān)(r=0.853，P<0.05)。(3)使用GC前，SSNS患兒PBMC MDR1mRNA及P-gp170的表達(dá)均高于control組，差異均有顯著性(P均<0.05)；足量GC治療4周后二者表達(dá)量明顯增高，與GC治療前比較差異均有顯著性(P均<0.05)；停用GC二月后二者表達(dá)量明顯回落，與GC治療前比較差異均無(wú)顯著性(P均>0.05)

4、。(4)使用GC前，SRNS患兒PBMCMDR1mRNA及P-gp170的表達(dá)均高于control組兒童，差異均有顯著性(P均<0.01)；足量GC治療4周后二者的表達(dá)量明顯增高，與GC治療前比較差異均有顯著性(P均<0.05)；病情緩解停用GC二月后或病情不緩解但潑尼松每天用量小于0.5mg/kg時(shí)二者的表達(dá)量有所回落，但與GC治療前比較差異仍有顯著性(P均<0.05)。(5)分別對(duì)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)SRNS和SSNS患兒PBMC MDR1m

5、RNA/P-gp170的表達(dá)量進(jìn)行比較，SRNS患兒均明顯升高，差異有顯著性(P均<0.05)。(6) PNS患兒激素治療前PBMC P-gp170的表達(dá)量與復(fù)發(fā)的次數(shù)正相關(guān)(r=0.399，P<0.05)；SRNS患兒激素治療前PBMC P-gp170的表達(dá)量與24小時(shí)尿蛋白定量(24hUTP)及腎臟病理積分均有正相關(guān)關(guān)系(r分別為0,576，0.529，P均<0.05)。 結(jié)論：(1)健康兒童和PNS患兒PBMC均有MDR1

6、mRNA及P-gp170的表達(dá)。(2) PNS患兒PBMC MDR1mRNA與P-gp170的表達(dá)呈高度正相關(guān)。(3) PBMCP-gp170表達(dá)增高可能與PNS患兒GC耐藥有關(guān)，PNS患兒PBMC P-gp170表達(dá)增高可作為GC耐藥的標(biāo)志之一。(4)應(yīng)用GC可能誘導(dǎo)了PNS患兒PBMC P-gp170表達(dá)增高，推測(cè)可能是導(dǎo)致一部分PNS患兒GC耐藥的原因之一。(5) PBMC P-gp170表達(dá)增高與PNS活動(dòng)、復(fù)發(fā)及病理有關(guān)，可做