他克莫司對激素耐藥型腎病綜合征患兒MDR1及其P-gp170表達的影響及意義.pdf

1、目的：檢測原發(fā)性腎病綜合征（INS）患兒不同時間點外周血單個核細胞(PBMC)多藥耐藥基因（MDR1）及其糖蛋白170（P-gp170）的表達情況，探討激素耐藥型腎病綜合征（SRNS）患兒加用他克莫司（TAC）治療后其MDR1及其P-gp170表達的變化和臨床意義。
　　方法：選擇本院住院的原發(fā)性腎病綜合征（INS）患兒36例為研究對象，根據(jù)激素治療效果分成兩組：激素敏感型腎病綜合征（SSNS）組20例和激素耐藥型腎病綜合征（SR

2、NS）組16例；20名健康體檢兒童作為正常對照組（control）。分四個時間點采集外周血標本：（1）發(fā)病初未用糖皮質(zhì)激素（GC）時；（2）足量GC治療4周后；（3）SSNS組的GC減量4周后或SRNS組的加用TAC治療4周后；（4）SRNS組的加用TAC治療8周后。進行如下實驗：①實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應（RT－PCR）檢測SRNS和SSNS不同時間點PBMC MDR1mRNA的表達。②流式細胞儀（FCM）檢測SRNS和SSNS不

3、同時間點PBMC中淋巴細胞（Lymphocytes）上P-gp170的表達百分數(shù)。③16例SRNS患兒均在激素治療4周后行腎穿刺活檢術，10例正常腎組織為正常腎組織對照組，用免疫組織化學方法(IHC)檢測腎組織中P-gp170的表達。
　　結果：（1）INS患兒PBMC MDR1mRNA與Lymphocytes P-gp170的表達呈高度正相關（r=0.854，P<0.01）。（2）GC治療前，INS患兒PBMC MDR1mRNA

4、與Lymphocytes P-gp170表達量均高于Control組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（3）足量GC治療4周后，SSNS組和SRNS組患兒PBMC MDR1mRNA及Lymphocytes P-gp170的表達均較治療前明顯升高，差異均具統(tǒng)計學意義（P<0.01）。（4）GC減量4周后，SSNS患兒MDR1mRNA及Lymphocytes P-gp170的表達較前明顯回落，差異均具統(tǒng)計學意義（P<0.01），而與GC

5、治療前無明顯差異性（P>0.05）。（5）加用TAC治療4、8周后，SRNS組患兒PBMC MDR1mRNA及Lymphocytes P-gp170的表達均較前明顯回落（P<0.01），而加用TAC治療4周后的SRNS患兒兩指標的表達量明顯高于GC減量4周后的SSNS患兒（P<0.01）。（6）在SRNS組中，TAC治療8周后PBMC MDR1mRNA及Lymphocytes P-gp170的表達量明顯低于4周后（P<0.01），且與G

6、C治療前相比，無明顯統(tǒng)計學差異（P>0.05）。（7）SRNS患兒與正常腎組織對照組兒童腎組織中P-gp170主要表達于腎小管及腎間質(zhì)，SRNS組腎組織近曲小管和遠曲小管的P-gp170陽性率表達均明顯高于正常腎組織對照組（P<0.01），SRNS組內(nèi)近曲小管P-gp170陽性率表達明顯高于遠曲小管(P<0.01)。（8）足量GC治療4周后，SRNS患兒Lymphocytes P-gp170的表達量與腎組織近曲小管及遠曲小管P-gp17

7、0的表達量均呈正相關（r=0.547，P<0.05；r=0.541，P<0.05）。（9）GC治療前，SRNS組患兒PBMC P-gp170的表達量與24小時尿蛋白定量正相關(r=0.712，P<0.01)。
　　結論：（1）原發(fā)性腎病綜合征患兒PBMC MDR1mRNA與Lymphocytes P-gp170的表達呈高度正相關，即MDR1mRNA表達量越高，其蛋白產(chǎn)物P-gp170表達量越高；（2）激素耐藥型腎病綜合征（SRNS