Nephrin及WT1在原發(fā)性腎病綜合征腎小球的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：腎病綜合征（nephrotic syndrome，NS）臨床上表現(xiàn)為大量蛋白尿、低白蛋白血癥、水腫和高脂血癥。而腎小球?yàn)V過(guò)屏障中裂孔隔膜的結(jié)構(gòu)和功能的完整對(duì)蛋白尿的發(fā)生尤為關(guān)鍵。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)了多個(gè)位于裂孔隔膜上的相關(guān)分子：nephrin、CD2AP、podocin、WT1等。本研究旨在檢測(cè)原發(fā)腎病綜合征患者腎小球中nephrin、WT1的表達(dá)和分布特征，并與臨床指標(biāo)（如24小時(shí)尿蛋白定量、血肌酐、血漿白蛋白）進(jìn)行相關(guān)性研究，以探討它

2、們?cè)诘鞍啄虬l(fā)生中的可能機(jī)制。
　　 方法：（1）選擇符合原發(fā)腎病綜合征（nephrotic syndrome，NS）診斷標(biāo)準(zhǔn)（24小時(shí)尿蛋白>3.5g，血漿白蛋白<30g/L）的患者共80例（男性50例，女性30例）。根據(jù)病理診斷分為腎小球微小病變組（MCN）（20例，男15例，女5例），IgA腎病組（IgAN）（20例，男13，女7例，其中輕度系膜增生11例，局灶增生硬化8例，重度系膜增生1例），膜性腎病組（MN）（20例，男

3、12例，女8例，其中Ⅰ期膜18例，Ⅱ期膜2例），局灶節(jié)段硬化性腎小球硬化組（FSGS）（20例，男10例，女10例，其中非特殊型FSGS16例，頂端型FSGS2例，臍部型FSGS2例）。（2）選取10例（男5例，女5例）腎臟腫瘤切除術(shù)患者遠(yuǎn)離腫瘤的正常腎組織作為對(duì)照。（3）采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腎病綜合征和正常對(duì)照組患者腎小球nephrin、WT1的表達(dá)指數(shù)（EI）并進(jìn)行組間比較。（4）測(cè)定各組24小時(shí)尿蛋白定量、白蛋白、血肌酐的水平

4、，且分別與nephrin、WT1的EI水平進(jìn)行相關(guān)性分析。（5）臨床指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以X±s表示，nephrin、WT1在對(duì)照組、腎病綜合征各組表達(dá)關(guān)系采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較用SNK法分析。（6）采用SPSS16.0軟件處理數(shù)據(jù)，以p<0.05代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：1、臨床試驗(yàn)指標(biāo)：腎病綜合征組患者平均年齡（39.64±16.30歲）與正常對(duì)照組平均年齡（33.90±13.03歲）比較無(wú)明顯差異（P>0.05

5、）；正常對(duì)照組的24小時(shí)尿蛋白定量、血肌酐、血漿白蛋白分別為：（0.04±0.02g/24h）、（69.90±5.88μ mol/L）、（39.44±3.55g/L）。腎小球微小病變組（MCN）、IgA腎病組（IgAN）、膜性腎病組（MN）、局灶節(jié)段性腎小球硬化組（FSGS）的24小時(shí)尿蛋白定量分別為：（4.78±1.61 g/24h）、（5.55±1.86 g/24h）、（5.70±2.50 g/24h）、（4.54±1.63 g/2

6、4h）；各組血肌酐水平為（76.43±16.85μ mol/L）、（82.60±20.42μ mol/L）、（78.10±22.46μ mol/L）、（123.1±73.29μ mol/L）；各組白蛋白水平分別為（19.23±4.16 g/L）、（19.50±6.26g/L）、（21.11±4.82 g/L）、（20.33±8.09 g/L）。
　　 2、免疫組織化學(xué)結(jié)果：（1）正常對(duì)照組nephrin表達(dá)沿腎小球毛細(xì)血管壁，呈

7、均勻、線狀分布；腎病綜合征各組nephrin在腎小球中分布不均勻，呈顆粒狀或者團(tuán)塊狀，部分區(qū)域染色明顯減弱，部分區(qū)域線性消失。MN組（11.92±3.84）和IgAN組（11.70±4.13）與對(duì)照組（14.65±3.53）比較顯著降低（p<0.05）；腎病綜合征各組間比較沒(méi)有顯著性差異（p>0.05）。（2）WT1在正常對(duì)照組及腎病綜合征組腎小球足細(xì)胞胞核及胞漿內(nèi)表達(dá)。MCN組（2.54±0.85）、IgAN組（2.45±0.57）、

8、FSGS組（1.93±0.31）與正常對(duì)照組（3.51±0.51）比較明顯下降（p<0.05），MN組和正常對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（p>0.05）。
　　 3、免疫組化結(jié)果與臨床指標(biāo)相關(guān)性分析：原發(fā)性腎病綜合征患者腎小球nephrin、WT1的表達(dá)水平與24小時(shí)尿蛋白定量負(fù)相關(guān)（r=-0.216，p<0.05；r=-0.304，p<0.05），與血漿白蛋白正相關(guān)（r=0.300，p<0.05；r=0.338，p<0.05）

9、>　　 結(jié)論：1、腎小球內(nèi)nephrin特異性地表達(dá)于足細(xì)胞，沿腎小球毛細(xì)血管壁，呈均勻、線狀分布；腎病綜合征患者nephrin在腎小球中分布不均，呈顆粒狀或者團(tuán)塊狀，部分區(qū)域染色明顯減弱，部分區(qū)域線性消失。MN組和IgAN組與正常對(duì)照組比較顯著降低。nephrin的表達(dá)水平與24小時(shí)尿蛋白定量負(fù)相關(guān)，與血漿白蛋白正相關(guān)。
　　 2、WT1在腎小球足細(xì)胞胞核及胞漿內(nèi)表達(dá)。MCN組、IgAN組、FSGS組與對(duì)照組比較表達(dá)下降。W