CD2AP及WT1在原發(fā)性腎病綜合征腎小球的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：腎病綜合征的患者常伴有足細(xì)胞足突的缺失和融合，裂孔隔膜（slit diaphragm SD）是連接足細(xì)胞相鄰足突的蛋白復(fù)合體，大量蛋白尿與正常足細(xì)胞和裂孔隔膜結(jié)構(gòu)的破壞有很大關(guān)系。CD2AP（CD2 associated protein CD2AP）是位于裂孔隔膜的一種蛋白，參與細(xì)胞骨架的組裝、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和足細(xì)胞凋亡等，是腎小球足細(xì)胞損傷的一個(gè)早期重要指標(biāo)。
　　 Wilm腫瘤蛋白1（Wilms'tumor1WT1）作為

2、一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，在成人腎小球足細(xì)胞內(nèi)持續(xù)表達(dá)，對(duì)維持正常的足細(xì)胞功能起著重要作用。
　　 本文采用免疫組化的方法檢測(cè)CD2AP、WT1在成人原發(fā)性腎病綜合征不同病理類型腎小球的表達(dá)，并分別分析其與臨床指標(biāo)（如24小時(shí)尿蛋白定量、血肌酐、腎小球硬化率）的關(guān)系。
　　 方法：（1）原發(fā)性腎病綜合征患者80例，平均年齡（39.64±16.3歲），男50例，女30例。依據(jù)病理分型分為腎小球微小病變組（MCN），IgA腎病組（其

3、中局灶增生硬化性IgA腎病8例，輕度系膜增生性IgA腎病11例，重度系膜增生性IgA腎病1例），膜性腎病組（其中Ⅰ期MN18例，Ⅱ期MN2例），局灶節(jié)段性腎小球硬化組（其中頂端型2例，臍部型2例，非特殊型16例），每組各20例。（2）正常對(duì)照組10例腎臟腫瘤切除術(shù)患者腫瘤遠(yuǎn)端正常腎組織，男5例，女5例。（3）實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組均在腎活檢或腎切除前留取尿液和血清標(biāo)本，測(cè)定24小時(shí)尿蛋白定量、血肌酐、血清白蛋白。（4）采用北航Motic M

4、ed6.0圖像分析系統(tǒng)檢測(cè)腎小球CD2AP及WT1的表達(dá)指數(shù)（EI），計(jì)數(shù)光鏡下腎小球硬化率（光鏡下硬化腎小球數(shù)/腎小球總數(shù)×100％）。（5）臨床指標(biāo)與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用X±s表示，CD2AP及WT1在各組表達(dá)的比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用SNK法。CD2AP、WT1與24小時(shí)尿蛋白定量、血肌酐、腎小球硬化率間采用直線相關(guān)分析。（6）采用SPSS16.0軟件處理數(shù)據(jù)，以p<0.05代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：1、臨床

5、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)：對(duì)照組患者的24小時(shí)尿蛋白定量、血肌酐分別為：（0.04±0.02g/24h）、（69.90±5.88umol/L）；腎小球微小病變組（MCN）、IgA腎病組（IgAN）、膜性腎病組（MN）、局灶節(jié)段腎小球硬化組（FSGS）的24小時(shí)尿蛋白定量分別為：（4.78±1.61 g/24h）、（5.55±1.86 g/24h）、（5.70±2.50 g/24h）、（4.54±1.63 g/24h）；各組血肌酐水平為（76.43±16

6、.85μ mol/L）、（82.60±20.4μ mol/L）、（78.10±22.46μ mol/L）、（123.1±73.29μ mol/L）；各組硬化率分別為（3.41±6.22）％、（2.48±6.01）％、（2.51±3.80）％、（6.14±11.60）％。
　　 2、免疫組化結(jié)果：（1）CD2AP在對(duì)照組和腎病綜合征各組的腎小球和部分腎小管上皮細(xì)胞刷狀緣均有表達(dá)。在正常對(duì)照組CD2AP沿毛細(xì)血管壁呈均勻、線狀分布。

7、MCN組、MN組、FSGS組CD2AP沿毛細(xì)血管壁不均勻分布，呈細(xì)顆粒狀，部分毛細(xì)血管壁表達(dá)缺失；IgAN組CD2AP表達(dá)不均呈斷續(xù)不等顆粒狀，在病變區(qū)域表達(dá)缺失。對(duì)照組CD2AP表達(dá)的EI值為（14.35±3.29），MCN組、IgAN組、MN組、FSGS組腎小球CD2AP表達(dá)的EI值分別為（11.69±3.36）、（11.84±4.37）、（7.67±3.06）、（8.71±3.06）。MN組和FSGS組與對(duì)照組比較顯著降低（p<0

8、.05）；MCN組、IgAN組與對(duì)照組無顯著差異；MN組及FSGS組顯著低于MCN組、IgAN組（p<0.05）。（2）WT1在對(duì)照組腎小球內(nèi)沿毛細(xì)血管壁呈均勻分布。MCN組、FSGS組WT1表達(dá)較均勻但強(qiáng)度減弱，IgAN組病變區(qū)域表達(dá)缺失。對(duì)照組WT1的EI值為（3.51±0.51），MCN組、IgAN組、MN組、FSGS組WT1的EI值為（2.54±0.85）、（2.45±0.57）、（3.71±1.08）、（1.93±0.31）；

9、 MCN組、IgA組、FSGS組與對(duì)照組比有差異（p<0.05），表達(dá)明顯降低，而MN與對(duì)照組比差異不明顯。各個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間無差異（p均>0.05）。
　　 3、免疫組化與臨床指標(biāo)相關(guān)性分析：原發(fā)性腎病綜合征患者腎小球CD2AP的表達(dá)水平與24小時(shí)尿蛋白定量負(fù)相關(guān)（r=-0.861，p<0.05），與血肌酐、腎小球硬化率無相關(guān)性（r值分別為0.056、0.120，p均>0.05）。腎小球WT1的表達(dá)水平與24小時(shí)尿蛋白定量負(fù)相關(guān)（

10、r=-0.304，p<0.05），與血肌酐、腎小球硬化率無相關(guān)性（r值分別為-0.256、-0.316，p均>0.05）。
　　 結(jié)論1.CD2AP特異表達(dá)于腎小球內(nèi)足細(xì)胞，沿腎小球毛細(xì)血管壁，呈均勻、線狀分布。原發(fā)性腎病綜合征患者CD2AP在腎小球中不均勻分布，呈顆粒狀，部分區(qū)域表達(dá)減弱或缺失。MN組和FSGS組與對(duì)照組比較顯著降低，MCN組、IgAN組與對(duì)照組無顯著差異；MN組及FSGS組顯著低于MCN組、IgAN組。CD2