Ezrin及WT1在原發(fā)性膜性腎病腎小球的表達及意義.pdf

1、目的：原發(fā)性膜性腎病(IMN)作為一種慢性腎炎的常見病理類型，其病情存在逐漸惡化和自發(fā)緩解兩種不同預后。IMN藥物治療時間長、敏感性不一，副作用多，因此有關IMN發(fā)病機理及影響預后因素的研究一直受到人們的重視。大量的臨床和實驗研究表明，IMN作為免疫復合物介導的腎小球腎炎，其臟層上皮細胞即足細胞下免疫復合物沉積導致了足細胞和足細胞相關蛋白的改變。 埃茲蛋白(ezrin)是近年來被認識的一種足細胞蛋白，屬于細胞膜細胞骨架連接蛋白(

2、ERM)家族，它與肌動蛋白(actin)細胞骨架和特定部位的細胞膜結構相連，參與維持細胞的形態(tài)、信號轉導和生長控制等。在腎臟疾病的實驗模型中，ezrin被認為是一種有活性或死亡的足細胞標記。有文獻報道，在不同致病機制引起的足細胞損傷中，ezrin免疫的表達有著明顯的差異。 Wilm腫瘤蛋白1(WT1)作為一種轉錄調節(jié)因子，腎臟形成后，其表達則僅限于足細胞中，對維持正常的足細胞功能起著非常重要的作用。已有研究顯示，WT1表達水平下

3、降可導致新月體腎炎或系膜硬化，另外WT1可轉錄活化足細胞裂孔膜蛋白nephrin。 本文研究的目的是通過免疫組化的方法檢測ezrin、WT1在IMN患者腎小球中表達水平的變化，并與臨床常用實驗指標(如24小時尿蛋白定量、血肌酐)進行相關性研究，探討ezrin、WT1是否可以作為判斷IMN嚴重程度的免疫組化指標，并進一步分析ezrin、WT1免疫組化表達與腎臟損害的關系，從而為IMN發(fā)病的研究提供更多的視角，為臨床診治、預后判斷提

4、供新的思路和方法。方法：(1)IMN組病例來源于2005年12月至2006年12月在河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院腎內科病房住院診治并經(jīng)臨床和病理確診的25例：IMN忠者，依據(jù)其病理分期進一步分為I期IMN組(13例)、II期IMN組(8例)、III+Ⅳ期IMN組(4例)三組。(2)對照組病例來源于河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院泌尿外科6例因腎臟腫瘤切除一側腫瘤腎后經(jīng)病理證實為腎臟良性腫瘤的患者。(3)IMN各組及對照組均在腎活檢或腎切除前留取尿液、血清標

5、本。(4)采用免疫組織化學方法分別檢測I期IMN組、II期IMN’組、III+Ⅳ期IMN組患者與對照組患者腎小球ezrin及WT1的表達指數(shù)(EI)并分別進行組間比較，(5)測定各組24小時尿蛋白定量、血肌酐的水平，且分別與ezrin及WT1的EI水平進行相關性分析。(6)臨床指標及實驗數(shù)據(jù)以x士s表示，ezrin、WT1在對照組、I期IMN組、II期IMN組及III+Ⅳ期IMN組表達的關系組間采用單因素方差分析，進一步兩兩比較用SNK

6、法分析。ezrin、WTl與24h尿蛋白定量、血肌酐間采用直線相關分析。(7)采用SPSS 10.0軟件處理數(shù)據(jù)，以尸＜0.05代表有統(tǒng)計學意義。 結果： 1 臨床實驗指標：IMN組患者平均年齡(42.52±12.71)與對照組患者平均年齡(41±13.78)比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)；對照組患者的的24小時尿蛋白定量、血肌酐分別為：(0.05±0.04.g/24h)、(79.93±11.52μmol/L)；I期IMN組、

7、II期IMN組和III+IV期IMN組24小時尿蛋白定量分別為：(5.02±2.14 g/24h)、(7.39±2.54 g/24h)、(9.53±3.78 g/24h)；I期IMN組、II期IMN組和III+IV期IMN組血肌酐水平分別為：(74.65±13.47μmol/L)、(100.34±39.66μmol/L)、(151.68±34.65μmol/L)。 2 免疫組織化學結果：(1)ezrin在IMN組、對照組腎小球壁層、臟層

8、上皮細胞和腎小管上皮細胞均有表達，在腎小球主要表達于足細胞。I期IMN組、II期IMN組和III+IV期IMN組腎小球ezrin表達的EI值分別為：(8.36±1.75)、(5.61±1.64)、(3.47±0.76)，均較對照組(10.79±1.85)顯著降低(P均＜0.01)；I期IMN組、II期IMN組與III+IV期IMN組腎小球足細胞ezrin的表達依次逐漸降低，各組間表達差異均有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05)。(2)WT1在I

9、MN組、對照組腎小球足細胞細胞核及胞漿內表達。I期IMN組、II期IMN組腎小球內WT1表達的EI值分別為(7.31±2.76)、(9.25±4.02)與對照組(9.42±4.38)比較均無明顯變化(P均＞0.05)；I期IMN組、II期IMN組和對照組腎小球WT1表達的EI值均顯著高于III+IV期IMN組(3.71±0.66)(P均＜0.01)。 3.免疫組化結果與臨床指標相關性分析：IMN患者腎小球ezrin的表達水平與2

10、4小時尿蛋白定量負相關(r=-0.615，P＜0.01)，與血肌酐負相關(r=-0.395，P=0.028)。IMN患者腎小球WT1的表達與尿蛋白定量、血肌酐均無相關性(r值分別為-0.178、-0.256，P值均＞0.05)。 結論 1 提示ezrin在IMN的早期即可反映足細胞的損傷，且能反映出IMN病理發(fā)展過程中足細胞受損的嚴重程度，因而ezrin有可能成為判斷IMN足細胞損害的免疫組化敏感指標。 2 IMN忠者腎小球內e