CXCL16在原發(fā)性腎病綜合征中的變化及其臨床意義.pdf

1、研究背景與研究目的:
　　 原發(fā)性腎病綜合征(primary nephrotic syndrome，PNS)是一組由各種原因引起的腎小球?yàn)V過膜對血漿蛋白通透性增高，大量血漿蛋白自尿中流失，從而導(dǎo)致一系列病理生理改變的臨床綜合征，即大量蛋白尿、低蛋白血癥、明顯水腫和高脂血癥。雖然臨床多數(shù)患兒對激素治療反應(yīng)敏感，預(yù)后良好，但部分患兒對激素治療依賴或抵抗，最終可能進(jìn)展為腎小球硬化，導(dǎo)致終末期腎臟疾病(ESRD)。自1982年，Moor

2、head等首次提出“脂質(zhì)腎毒性”學(xué)說以來，大量的研究結(jié)果表明，高脂血癥和脂質(zhì)在腎臟沉積是發(fā)生腎小球硬化的重要危險因素，而腎小球硬化的病理生理和組織學(xué)變化，如血脂異常、病變早期表現(xiàn)內(nèi)皮損害、后期出現(xiàn)系膜細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)積聚，這些機(jī)制與動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制相似，因此提出了“腎小球動脈硬化”這一概念。目前有關(guān)脂質(zhì)在腎臟中的沉積，促使腎臟細(xì)胞發(fā)生泡沫樣改變，從而導(dǎo)致腎損害的機(jī)制仍不完全清楚。
　　 趨化因子是一組具有趨化作用的細(xì)胞

3、因子，通過趨化作用能募集免疫細(xì)胞到達(dá)免疫應(yīng)答部位，參與炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答過程。CXC趨化因子配體16(CXC chemokine ligand 16，CXCL16)是由Matloubian和Wilbanks等分別在2000年和2001年報(bào)道，是唯一以兩種形式存在的趨化因子，即跨膜型和可溶型?？缒ば鸵钥缒そY(jié)合的形式表達(dá)于細(xì)胞表面，一方面可作為細(xì)胞表面的粘附分子發(fā)揮作用，另一方面可作為清道夫受體發(fā)揮生物作用。在解整合素樣金屬蛋白酶(ADAM

4、10或ADAM17)的剪切作用下，膜結(jié)合型CXCL16可脫落形成具有趨化活性的可溶型CXCL16，招募表達(dá)趨化因子受體CXCR6的活化T細(xì)胞和NKT細(xì)胞等。目前在已知的趨化因子受體中，只有CXCR6對CXCL16配體產(chǎn)生功能性應(yīng)答，是CXCL16的唯一受體。近年來發(fā)現(xiàn)CXCL16參與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。
　　 目前有關(guān)CXCL16與腎臟疾病炎癥發(fā)生發(fā)展關(guān)系的報(bào)道較少。研究顯示，CXCL16參與腎臟疾病炎癥細(xì)胞趨化反應(yīng)，并可作

5、為oxLDL(Oxidized Low-Density Lipoprotein，oxLDL)的清道夫受體。本實(shí)驗(yàn)擬通過觀察CXCL16在兒童單純型腎病綜合征中的變化及其與血清白蛋白、IFN-γ、血脂代謝以及24h尿蛋白的關(guān)系，初步探討CXCL16在原發(fā)性單純型腎病綜合征發(fā)生中的作用，有望對腎病綜合征的發(fā)病機(jī)理和治療提供新的理論依據(jù)。
　　 研究對象：
　　 選擇臨床診斷為單純型NS的患兒50例，將25例（男16例，女9例

6、，平均5歲）激素治療療程結(jié)束的患兒分為活動期組和緩解期組:活動期組為25例，均為未使用過激素及其他免疫抑制劑，并且臨床癥狀明顯;緩解期組25例為活動期隨診至停用潑尼松治療。對照組:以年齡和性別相匹配的正常健康體檢兒童20例（男12例，女8例，平均年齡7.6歲）作為正常對照組，均排除了腎臟病及有腎臟病家族史者，且既往無感染性疾病和免疫抑制劑應(yīng)用史。
　　 方法：
　　 各組兒童分別采集清晨空腹靜脈血5ml，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢

7、測T細(xì)胞亞群及表達(dá)CXCR6的T細(xì)胞;應(yīng)用全自動生化分析儀采用酶法檢測血清膽固醇;采用溴甲酚綠法檢測白蛋白;采用比色法檢測甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇;采用雙抗夾心ELISA法測定血清CXCL16、IFN-γ和oxLDL。收集單純型NS活動期組患兒的24小時尿液，準(zhǔn)確記錄尿量，采用比色法檢測24h尿蛋白。
　　 結(jié)果：
　　 1.各組兒童血清CHOL、TG、LDL-C和oxLDL水平的比較與單純型NS緩解期組和正常對照組

8、相比，單純型NS活動期組血CHOL、TG、LDL-C和oxLDL明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。而緩解期組與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.各組兒童血清CXCL16和IFN-γ水平的變化與單純型NS緩解期組和正常對照組相比，單純型NS活動期組血清CXCL16和IFN-γ水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而緩解期組與正常對照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　

9、　 3.各組兒童外周血T淋巴細(xì)胞亞群及CXCR6+T細(xì)胞數(shù)的比較與單純型NS緩解期組和正常對照組相比，單純型NS活動期組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值、NK[CD(16+56)+]細(xì)胞均明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。而緩解期組與正常對照組比較，除NK[CD(16+56)+]細(xì)胞(P＜0.01)，其他差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。單純型NS活動期CD8+T細(xì)胞明顯高于對照組(P＜0.05)，而活動期與緩

10、解期比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與緩解期組和正常對照組相比，活動期組CXCR6+T細(xì)胞明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。而緩解期組與正常對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4.各指標(biāo)之間的相關(guān)性分析單純型NS活動期血膽固醇、甘油三酯、LDL-C、oxLDL均與24h尿蛋白呈正相關(guān)，分別為(r=0.514，P＜0.01;r=0.631，P＜0.01;r=0.516，P＜0.01;r=0.64

11、1，P＜0.01);血清CXCL16與血清IFN-γ(r=0.681，P＜0.01)、血膽固醇(r=0.796，P＜0.01)、甘油三酯(r=0.646，P＜0.01)、LDL-C(r=0.725,P＜0.01)、oxLDL(r=0.740,P＜0.01)、24h尿蛋白(r=0.736，P＜0.01)以及CXCR6+T細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)(r=0.580，P＜0.01)，而與血白蛋白呈負(fù)相關(guān)（r=-0.628，P＜0.01）;血清IFN-γ與

12、血膽固醇(r=0.806，P＜0.01)、甘油三酯(r=0.767，P＜0.01)、LDL-C(r=0.783，P＜0.01)、oxLDL(r=0.825，P＜0.01)、24h尿蛋白(r=0.739，P＜0.01)呈正相關(guān)，而與血白蛋白呈負(fù)相關(guān)(r=-0.683，P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.單純型NS活動期血膽固醇、甘油三脂、LDL-C和oxLDL均明顯升高，說明NS存在血脂代謝紊亂。同時血膽固醇、甘油三

13、脂、LDL-C和oxLDL與24h尿蛋白均呈正相關(guān)，提示血膽固醇、甘油三脂、LDL-C和oxLDL可能參與NS的發(fā)生。
　　 2.單純型NS活動期血清CXCL16和IFN-γ均明顯高于緩解期組和正常對照組，而緩解期血清CXCL16和IFN-γ水平與正常對照組比較無差異。相關(guān)分析結(jié)果顯示，單純型NS活動期血清CXCL16和IFN-γ水平均與血膽固醇、甘油三酯、LDL-C、oxLDL、24h尿蛋白呈正相關(guān)，與血清白蛋白呈負(fù)相關(guān)，提示

14、CXCL16和IFN-γ可能參與NS的發(fā)病，且與腎病的活動有關(guān)。
　　 3.單純型NS活動期血清CXCL16與IFN-γ均顯著升高，且相關(guān)性分析顯示，血清CXCL16與IFN-γ呈正相關(guān)，提示單純型NS中IFN-γ的升高可能是血清CXCL16表達(dá)增加的一個刺激因素。
　　 4.單純型NS活動期患兒外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值、NK[CD(16+56)+]細(xì)胞均明顯降低，而CD8+T細(xì)胞明顯升高，提示N