不同表型表皮葡萄球菌之間的相互作用及LuxS基因?qū)ι锬ば纬傻挠绊?pdf

1、目的：
　　探討不同表型的表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)之間的相互作用機(jī)制以及l(fā)uxS基因在SE形成生物膜過(guò)程中所起的作用。
　　方法：
　　(1)分別應(yīng)TSB培養(yǎng)液、上清液1以及上清液2培養(yǎng)產(chǎn)生物膜的表皮葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC35984和不產(chǎn)生物膜的ATCC12228菌株,并采用剛果紅平板法定性檢測(cè)細(xì)菌間多糖粘附素(polysaccharide intercellular

2、 adhesin,PIA)。(2)分別用上清液2與上清液3培養(yǎng)PIA陽(yáng)性菌株ATCC35984以及上清液1培養(yǎng)PIA陰性菌株 SE ATCC12228,分別將培養(yǎng)后的細(xì)菌接種于96孔平板中,觀察不同方法培養(yǎng)細(xì)菌的粘附情況。(3)分別觀察SE ATCC35984在培養(yǎng)液1(上清液2采用TSB倍倍稀釋法)以及SE ATCC12228在培養(yǎng)液2(上清液1采用TSB倍倍稀釋法)在96孔板粘附情況。(4)收集TSB以及上清液1培養(yǎng)后SE ATCC

3、12228菌株和通過(guò)TSB以及上清液2培養(yǎng)后SE ATCC35984,提取總RNA,應(yīng)用RT-PCR實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)不同細(xì)菌中LuxS表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　(1)葡萄球菌在剛果紅培養(yǎng)基生長(zhǎng)情況在對(duì)照組A1組中SEATCC35984菌株菌落在剛果紅平板上呈黑色、光亮、干燥菌落,而在實(shí)驗(yàn)組A2中,該菌株菌落為底黑酒紅色。在對(duì)照組B1菌株菌落在剛果紅平板上呈紅色光滑菌落,而在實(shí)驗(yàn)組菌菌株在剛果紅平板上呈底黑酒紅色。(2)對(duì)照組A

4、1組菌株形成厚厚致密的生物膜,而實(shí)驗(yàn)組A2組菌株形成的生物膜較薄,比較稀疏。兩組菌株OD值之間比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。對(duì)照組B1組菌株不能形成生物膜,而經(jīng)上清液1培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)組B2菌株能成的明顯的生物膜,兩組菌株OD值之間比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。另其它空白對(duì)照組C組中TSB培養(yǎng)液、上清液1以及上清液2均不能形成生物膜。(3)在培養(yǎng)液1稀釋至256倍后,SE ATCC35984產(chǎn)生的生物膜與在TSB培養(yǎng)產(chǎn)

5、生的生物膜的OD值基本一致,在培養(yǎng)液2稀釋至16倍后,SE ATCC12228基本不產(chǎn)生物膜。(4)在ATCC35984上清液中,ATCC12228菌株形成生物膜的能力增強(qiáng),LuxS基因表達(dá)降低。在ATCC12228菌株上清液中,ATCC35984產(chǎn)生生物膜能力下降,LuxS基因表達(dá)增強(qiáng),兩者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.不同表型表皮葡萄球菌之間可能存在著相互影響的現(xiàn)象。
　　2.Lux