金黃色葡萄球菌臨床分離株的生物膜形成及相關(guān)基因檢測(cè).pdf

1、目的:
　　 檢測(cè)臨床分離的金黃色葡萄球菌生物膜形成情況及其相關(guān)基因,構(gòu)建金黃色葡萄球菌ica同源重組質(zhì)粒,為研究其生物膜形成機(jī)制的奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1.全自動(dòng)微生物分析儀法和mecA基因PCR擴(kuò)增檢測(cè)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌臨床株的耐藥分型和基因;
　　 2.利用96孔板結(jié)晶紫染色法檢測(cè)臨床菌株生物膜形成情況;
　　 3.分別采用掃描電子顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡驗(yàn)證臨床菌株生物膜形

2、成;
　　 4.PCR法檢測(cè)金黃色葡萄球菌生物膜形成相關(guān)基因ica,sarA,agr,及mgrA;
　　 5.構(gòu)建金黃色葡萄球菌ica同源重組質(zhì)粒。
　　 結(jié)果:
　　 1.92株金黃色葡萄球菌臨床株經(jīng)mecA基因檢測(cè)出MRSA74株,檢出率為80.4%(74/92),全自動(dòng)微生物分析儀檢測(cè)出苯唑西林耐藥69株,耐藥率為75%,兩種檢測(cè)方法的一致率為94.6%(87/92);
　　 2.在TSBg

3、luc0.5%培養(yǎng)基中,92株金黃色葡萄球菌臨床分離株均可形成肉眼所見(jiàn)的生物膜,其中63株生物膜形成能力較強(qiáng);
　　 3.掃描電子顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡下分別觀察到菌株JB-37生物膜的結(jié)構(gòu);
　　 4.PCR檢測(cè)結(jié)果顯示92株實(shí)驗(yàn)菌株均具有sarA基因,其中78株具有ica操縱子,88株具有agr基因,89株具有mgrA基因;
　　 5.成功構(gòu)建了金黃色葡萄球菌ica同源重組質(zhì)粒。
　　 結(jié)論: