鼠尾草精油納米脂質(zhì)體對金黃色葡萄球菌生物膜的控制.pdf

1、從植物中提取的鼠尾草精油，天然安全無毒，具有較濃郁的香氣，能賦予食品特殊的香氣。除此之外，鼠尾草精油還具有很好的殺菌效應(yīng)，是一種有待開發(fā)的天然殺菌劑，在食品行業(yè)中有較好的應(yīng)用前景。但因其主要抗菌成分乙酸芳樟酯、芳樟醇等物質(zhì)易揮發(fā)，若直接用于食品防腐會影響其抗菌效果。因此，本實驗致力于研究鼠尾草精油納米脂質(zhì)體的制備，將鼠尾草精油包裹于納米脂質(zhì)體中，利用金黃色葡萄球菌生物膜釋放的α-毒素的成孔特性，對脂質(zhì)體刺激響應(yīng)，靶向釋放鼠尾草精油。本論

2、文將鼠尾草精油納米脂質(zhì)體應(yīng)用在易感染金黃色葡萄球菌的乳制品加工器具表面，從而實現(xiàn)鼠尾草精油的活性成分緩慢釋放，并始終保持環(huán)境所需的抗菌濃度，達(dá)到所需的抗菌效果。本研究得到的主要結(jié)果如下：
　?。?）本實驗首先對鼠尾草精油的主要成分進行了測定，GC-MS實驗結(jié)果顯示，鼠尾草精油的主要成分為乙酸芳樟酯（74.562％）。隨后本實驗研究了鼠尾草精油的抗菌性能及其抗菌機制。實驗結(jié)果表明，鼠尾草精油對實驗所選的七種食源性病原菌都具有較好的抑

3、菌和殺菌效果，鼠尾草精油對七種參試菌的最小殺菌濃度在0.5~1 mg/mL之間，對其最小抑菌濃度在0.25~0.5 mg/mL之間。并且作用時間越長，細(xì)菌死亡率越高，當(dāng)鼠尾草精油作用時間達(dá)到2 h時，金黃色葡萄和大腸桿菌的死亡率均達(dá)到99.999%以上。在精油殺菌機制研究中，SEM和TEM圖顯示，經(jīng)過精油處理之后，細(xì)菌細(xì)胞壁和細(xì)胞膜有一定程度的溶解、凹陷、變形，細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)等遭到破壞。隨著鼠尾草精油濃度的增加，其相對應(yīng)的260 nm

4、處的吸光度值逐漸增加，細(xì)胞膜的通透性越強，胞內(nèi)ATP總含量明顯減少，并且細(xì)菌胞內(nèi)核酸含量大量降低。
　?。?）本實驗對鼠尾草精油的抗金黃色葡萄球菌生物膜的性能進行了研究。ESEM結(jié)果顯示，鼠尾草精油對纖維膜上金黃色葡萄球菌生物膜有較好的清除效果。在鼠尾草精油對金黃色葡萄球菌生物膜的抑制和清除實驗中，MTT染色法和平板菌落計數(shù)法展現(xiàn)了較為一致的實驗結(jié)果。抑制實驗結(jié)果表明當(dāng)鼠尾草精油濃度達(dá)到2 mg/mL時，不銹鋼片表面并無生物膜生成

5、，鼠尾草精油濃度達(dá)到3 mg/mL時，塑料和玻璃表面生物膜的形成被完全抑制了。在清除實驗中，8 h時，8 mg/mL濃度的精油對不銹鋼、塑料片和玻璃片表面的生物膜清除率均達(dá)到了99.99%以上。
　?。?）本實驗采用薄膜超聲波分散法制備了鼠尾草精油納米脂質(zhì)體，并對其理化性質(zhì)進行了測定。實驗測定結(jié)果顯示，鼠尾草精油納米脂質(zhì)體粒徑為188.5±6.55 nm，PDI為0.189±0.021，表面Zeta電位為-48.38±0.32，濁

6、度為824±32.5 NTU，pH值為6.23±0.02，包封率為46.51±0.67%。鼠尾草精油納米脂質(zhì)體的AFM、TEM和SEM觀察結(jié)果皆表明脂質(zhì)體為球形，分散均勻，為納米級脂質(zhì)，具有較高的穩(wěn)定性。
　?。?）GC-MS分析和平板菌落計數(shù)法驗證了金黃色葡萄球菌釋放的成孔毒素能有效的釋放脂質(zhì)體中包裹著的鼠尾草精油，從而達(dá)到靶向殺菌的效果。最后，本實驗證實了鼠尾草精油納米脂質(zhì)體對附著在乳制品器具表面的金黃色葡萄球菌生物膜均具有良