高壓電燒傷大鼠血清TSP、vWF變化及烏司他丁、甲基強的松龍干預(yù)作用.pdf

1、目的:高壓電燒傷是一種特殊原因的燒傷，無論其面積大小，均可在創(chuàng)面局部和（或）全身遠隔組織、器官出現(xiàn)微循環(huán)紊亂。電流通過機體時主要沿電阻較小的血液和神經(jīng)走行，故電流對血管損傷極為明顯。對于微血管，電流可直接損傷其內(nèi)皮細胞，引起血管內(nèi)皮系統(tǒng)釋放血管活性物質(zhì)，導(dǎo)致致炎狀態(tài)、高凝狀態(tài)的發(fā)生及微血管通透性增強，血管內(nèi)白細胞與內(nèi)皮細胞黏附增加、紅細胞聚集、微血栓形成以及血液黏度增加等，從而影響微循環(huán)血液流動，導(dǎo)致機體微循環(huán)障礙。已有實驗證明，血小板

2、反應(yīng)蛋白(TSP)對血管修復(fù)及生成有抑制作用，血管性假性血友病因子(vWF)是血管內(nèi)皮細胞受損的重要標志之一。本實驗?zāi)康脑谟谕ㄟ^觀察高壓電流對TSP、vWF的影響，進一步探討高壓電燒傷對內(nèi)皮細胞損傷引起機體微循環(huán)紊亂的機制及烏斯他丁(UTI)、甲基強的松龍(MP)對血清TSP、vWF表達的干預(yù)作用，為高壓電燒傷后微循環(huán)障礙的防治提供實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 1實驗動物分組:健康成年SD大鼠（河北醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心

3、提供，合格證編號1211057）240只，雌雄不拘，按隨機數(shù)字表法分成四組，即假高壓電燒傷組（簡稱對照組）、高壓電燒傷組（簡稱電傷組）、高壓電燒傷UTI治療組（簡稱治療1組），高壓電燒傷MP治療組（簡稱治療2組），每組各60只，以上四組又分別分為電傷前15min、電傷后5min、1h、2h、4h、8h6個不同的時相，每時相10只。
　　 2實驗前準備:將大鼠編號、稱重、左上肢、右下肢及前胸脫毛。按所需濃度配制實驗藥品。
　

4、　 3高壓電燒傷模型制作:先檢查輸入電源總開關(guān)，保證其處于關(guān)閉狀態(tài)，然后正確連接實驗變壓器和調(diào)壓器導(dǎo)線。用1％戊巴比妥鈉溶液腹腔注射麻醉大鼠(40mg/kg)，麻醉成功后，將大鼠仰臥于專用電擊實驗臺上，將兩個1cm×1cm電極片分別固定于大鼠的左上肢（電流入口）、右下肢（電流出口）脫毛區(qū)。接通輸入電源總開關(guān)，調(diào)整調(diào)壓器使升壓器輸出電壓升至2kV，然后連接升壓器輸出端電源，使高壓電流通過大鼠身體，保持電擊時間持續(xù)3s，流經(jīng)大鼠的電流強度

5、為（1.85±0.25）A。對照組大鼠給予只連導(dǎo)線而不通電的方法，制作假電傷模型。電傷5min內(nèi)，治療1組腹腔內(nèi)注射UTI溶液（5×104u/kg，即按7mL/kg給藥），治療2組腹腔內(nèi)注射MP溶液（750mg/kg，即按6mL/kg給藥），對照組及電傷組腹腔內(nèi)注射相等量生理鹽水。
　　 4標本采集與保存:將模型復(fù)制成功的大鼠開胸暴露心臟，直視下心臟采血約6mL，靜置30min，待血清析出后上離心機，以3000轉(zhuǎn)/min離心10

6、min，取上清液置于Eppendorf管中在-70℃條件下保存。
　　 5指標檢測:采用ELISA雙夾心抗體法，分別檢測每組大鼠六個時相組血清TSP、vWF含量。
　　 6實驗數(shù)據(jù)處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，行兩因素析因設(shè)計的方差分析，以p＜0.05為顯著性檢驗水準。
　　 結(jié)果:
　　 1大鼠血清TSP含量變化
　　 電傷組TSP含量總體高于對照組（主效應(yīng)F=62.54，P＜0.001）

7、;電傷組TSP含量受傷后時間變量影響(F=3.52，P＜0.01)，傷后5min～8h各時相均高于本組傷前值(P＜0.01)，至傷后4h達最高值，為（163.28±38.28）ng/mL，高于傷前的(108.91±25.07)ng/mL，8h后逐漸回落，但仍維持較高水平。
　　 UTI治療組TSP含量總體低于電傷組（主效應(yīng)F=23.05，P＜0.001）;治療1組血清TSP含量在傷后5min仍高于電傷前15min水平，其差異有顯

8、著性(P＜0.05)，傷后4hUTI治療組TSP的含量基本恢復(fù)至電傷前15min的水平，無顯著性差異（P＞0.05）。
　　 MP治療組TSP含量總體低于電傷組（主效應(yīng)F=171.49，P＜0.001）;治療2組受傷后時間變量影響（主效應(yīng)F=2.76，P＜0.05），治療2組傷后5min、1h、2h、4h、8h各時相均明顯低于本組傷前值（P＜0.01）。
　　 2大鼠血清vWF含量變化
　　 電傷組vWF含量總體

9、高于對照組（主效應(yīng)F=103.52，P＜0.001）;電傷組vWF含量受傷后時間變量影響（主效應(yīng)F=5.20，P＜0.001），傷后5min～8h各時相均高于本組傷前值(P＜0.001)，傷后即刻達最高值，后隨時間呈下降趨勢，至傷后8h仍高于對照組水平。
　　 治療1組vWF含量總體低于電傷組（主效應(yīng)F=4.04，P＜0.05），治療1組vWF含量受傷后時間變量影響（主效應(yīng)F=7.45，P＜0.001），傷后5min～8h各時相

10、均高于本組傷前值(P＜0.001)，隨時間呈逐漸下降趨勢，但傷后8h仍維持較高水平。
　　 治療2組vWF含量總體低于電傷組（主效應(yīng)F=44.29，P＜0.001）;治療2組vWF含量受傷后時間變量影響（主效應(yīng)F=4.73，P＜0.01），傷后5min、1h、2h、4h時相均高于本組傷前值(P＜0.001)，至治療8hvWF基本恢復(fù)至電擊前水平。
　　 結(jié)論:
　　 1高壓電燒傷可引起大鼠血清TSP含量升高，且在