高壓電燒傷大鼠血清脂聯(lián)素、纖維蛋白酶變化及烏司他丁干預(yù)作用.pdf

1、目的：高壓電燒傷不僅對機體造成熱力損傷，電流經(jīng)過身體，電場作用對機體血管、神經(jīng)各組織均造成不同程度的損傷。目前，國內(nèi)外專家學(xué)者對高壓電燒傷后毛細(xì)血管血流動力學(xué)改變的研究已經(jīng)廣泛的開展。研究表明，電燒傷后血管內(nèi)皮損傷，局部及全身的炎癥反應(yīng)造成血流動力學(xué)異常改變，以及血栓形成造成微循環(huán)出現(xiàn)障礙。電燒傷后導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)及血流動力學(xué)改變的因素有很多，其中血漿中的脂聯(lián)素(Adiponectin,ADP)、纖維蛋白酶（Brinase）在調(diào)節(jié)炎癥反

2、應(yīng)及血流動力學(xué)方面有著重要的作用。脂聯(lián)素是脂肪細(xì)胞分泌的一種具有多種生物學(xué)效應(yīng)的蛋白類物質(zhì)，它以內(nèi)分泌方式循環(huán)于血液中，在機體內(nèi)參與多種生命活動的調(diào)節(jié)。纖維蛋白酶以往是從米曲霉中提取的蛋白酶，能夠分解血凝塊的纖維蛋白和降低血漿中纖溶酶抑制物的濃度。電燒傷后對于大鼠血清纖維蛋白酶的定性及定量變化，并無相關(guān)性的研究。通過此次試驗檢測高壓電燒傷后大鼠血清ADP、Brinase的變化，并通過烏司他?。║linastatin， UTI）干預(yù)，旨在

3、進一步探索高壓電后血清 ADP、Brinase變化及其介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)及對凝血機制的影響和干預(yù)辦法。
　　方法：
　　1、實驗動物分組：本實驗采用健康的成年SD大鼠做為實驗研究對象，大鼠由河北醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供（合格證編號1411023），共計180只，按隨機區(qū)組設(shè)計法將其分為三組，這樣每組分別有60只大鼠，即假高壓電燒傷組（對照組）（60只)、高壓電燒傷組（電傷組）（60只）、高壓電燒傷烏司他?。║TI）治療組（治療組

4、）（60只）。每一組又按觀察時間的長短不同分成6個時相組，即電傷前15min、電傷后5min、電傷后1h、2h、4h、8h六個時相組，每一時相組包含10只大鼠。
　　2、實驗前準(zhǔn)備：?大鼠稱重并將其編號?按藥品說明配置實驗藥品使其達到實驗所需濃度?準(zhǔn)備采血管、采血針，記錄實驗數(shù)據(jù)。
　　3、高壓電燒傷模型制作：將實驗變壓器和調(diào)壓器電線連接，使其成為一個閉合回路。10％的水合氯醛（0.3ml/100g）溶液腹腔注射以麻醉實驗大

5、鼠，麻醉成功后，將大鼠四肢固定，仰臥位于專用的電擊實驗臺上，大鼠的左上肢（電流入口）脫毛區(qū)、右下肢（電流出口）脫毛區(qū)分別連接兩個1cm×1 cm電極片。確保所有實驗人員遠離電擊可波及的區(qū)域，這時再接通電源，調(diào)節(jié)調(diào)壓器旋鈕，使升壓器的輸出電壓達到2千伏，打開電源開關(guān)，使高壓電流通過大鼠身體，達到電擊的效果，電擊時間為3s，釋放閉合線路內(nèi)殘留的電流，將大鼠分籠放好，待采血?？瞻讓φ战M（假電組）則不給于接通高壓電流，其余步驟與電傷組及治療組的

6、處理相同。電傷組電后5min內(nèi)于大鼠腹腔內(nèi)注射生理鹽水5ml/kg，烏司他丁治療組電后5min內(nèi)于大鼠腹腔內(nèi)注射1%UTI（5ml/kg）。每組樣品按時相進行采血、分離血清。
　　4、標(biāo)本采集與保存：將高壓電燒傷后的大鼠再次麻醉，后開胸充分暴露心臟，于心臟內(nèi)直接抽血，血量約6mL，將抽出的血液注入促凝管中，靜置30min，待血清析出后，離心機3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液置于Eppendorf管中于-70℃條件下保存。<

7、br>　　5、指標(biāo)檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）雙抗體夾心法，分別檢測、計算每組大鼠的六個時相組血清ADP、Brinase含量。
　　6、實驗數(shù)據(jù)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，行兩因素析因設(shè)計的方差分析。以P＜0.05為顯著性檢驗水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1、大鼠血清ADP含量變化
　　高壓電燒傷組大鼠血清ADP含量與空白對照組有

8、顯著差異，總體低于空白對照組（主效應(yīng)F＝17.336，P＜0.05）；高壓電傷組血清ADP含量各時相變化有顯著差異（主效應(yīng) F＝20.094，P＜0.05），傷后5min～4h各時相均低于本組傷前值（P＜0.005），且呈逐漸降低那趨勢，在4h時相時達到最低，并在4-8h血清ADP水平開始升高，但電傷組ADP水平仍低于空白對照組相應(yīng)時相時ADP的水平。
　　治療組血清ADP含量與電傷組有顯著差異，總體高于電傷組（主效應(yīng)F＝5.41

9、9，P＜0.05）；治療組ADP含量各時相變化有顯著差異（主效應(yīng)F＝20.708，P＜0.05），治療組傷后5min～8h各時相均低于本組傷前值（P＜0.05）。
　　2、大鼠血清Brinase含量變化
　　高壓電傷組血清Brinase含量與空白對照組有顯著差異，總體高于對照組（主效應(yīng)F＝60.241，P＜0.05）；電傷組Brinase含量各時相變化有顯著差異（主效應(yīng)F＝59.298，P＜0.05），傷后5min～8h各時

10、相均高于本組傷前值（P＜0.05），且呈逐漸增高趨勢。
　　治療組血清Brinase含量與電傷組有顯著差異，總體低于電傷組（主效應(yīng)F＝34.613，P＜0.05）；治療組Brinase含各時相變化有顯著差異（主效應(yīng)F＝81.736，P＜0.05），治療組傷后5min～8h各時相均高于本組傷前值（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　高壓電燒傷可影響機體ADP、Brinase的表達，從而誘導(dǎo)過度的炎癥反應(yīng)，同時使機體處于高凝