高壓電燒傷大鼠Ang-Ⅱ和sVCAM-1變化及已酮可可堿干預(yù)作用.pdf

1、目前電燒傷研究中，已觀察到高壓電燒傷后動(dòng)物的深筋膜、軟腦膜、胃黏膜、腸黏膜、腸系膜、肝臟、腎皮質(zhì)等多部位發(fā)生微循環(huán)障礙。微血管的功能變化在微循環(huán)障礙的發(fā)生中起到至關(guān)重要的作用。血管緊張素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ，Ang-Ⅱ)可作用于血管平滑肌使血管強(qiáng)烈收縮，同時(shí)影響血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌NO等血管舒張因子，調(diào)節(jié)血管功能變化；血管細(xì)胞黏附分子-1（soluble Vascular Cell Adhesion Molecule-1，sVCA

2、M-1）形成與內(nèi)皮細(xì)胞激活有關(guān)，可反映血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷程度。為此設(shè)計(jì)本次實(shí)驗(yàn)，觀察兩者變化探討高壓電燒傷后微循環(huán)障礙發(fā)生機(jī)制。
　　 目的：
　　 通過(guò)檢測(cè)高壓電燒傷前、后及己酮可可堿干預(yù)治療后大鼠血清中Ang-Ⅱ及sVCAM-1的濃度變化，探討高壓電燒傷早期微循環(huán)障礙的發(fā)生機(jī)制。
　　 方法：
　　 采用隨機(jī)單位組析因設(shè)計(jì)。成年健康SD大鼠180只，雌雄不拘，雌鼠未孕，體重320g～380g。隨機(jī)分為

3、假高壓電燒傷組（對(duì)照組），高壓電燒傷組（電擊組）和高壓電燒傷后己酮可可堿干預(yù)組（治療組），分別于高壓電燒傷前1h、高壓電燒傷或給藥即刻(15min)、高壓電燒傷后1h、2h、4h、8h（分別記錄為T0、T1、T2、T3、T4、T5）6個(gè)時(shí)相采血檢測(cè)血清中Ang-Ⅱ和VCAM-1的含量，每時(shí)相10只SD大鼠。1％戊巴比妥鈉溶液（45mg/kg劑量）腹腔注射麻醉，麻醉成功后將大鼠左前肢、右后肢及胸、腹部備皮、脫毛，隨后將脫毛完畢的大鼠仰臥位

4、固定于絕緣臺(tái)上，并正確連接線路，左前肢為“電流入口”，右后肢為“電流出口”。調(diào)額定電壓至2KV，通電3s，電流強(qiáng)度為1.83±0.15A。電擊即刻，可見(jiàn)大鼠全身痙攣、僵直，斷電后，立即對(duì)大鼠進(jìn)行適當(dāng)胸外按壓，以保證大鼠心肺功能。電擊后可見(jiàn)“入口”、“出口”深達(dá)肌肉、骨骼，其邊緣蒼白、焦黃、炭化.部分動(dòng)物遠(yuǎn)端肢體離斷，高壓電燒傷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型復(fù)制成功〔1-4,9〕。治療組大鼠，斷電后即刻(1min)，腹腔注射1％己酮可可堿氯化鈉注射液（50

5、mg/Kg劑量）〔10-14〕；對(duì)照組和電擊組注射等量生理鹽水。對(duì)照組采用假電方法制作假電燒傷模型。假電方法：實(shí)驗(yàn)前斷開(kāi)380V電源，確保電路中無(wú)電流通過(guò)，其余同電擊組電燒傷模型復(fù)制方法。采血方法：打開(kāi)胸腔，暴露心臟，直視下自心尖部穿刺采血8ml～10ml，分置于PE管中。室溫靜置30min，待血液凝固，以1000×g15min離心，收集血清，置于超低溫冰箱-70℃冷凍保存待用。用Ang-ⅡELSIA試劑盒和sVCAM-1ELSIA試劑

6、盒，按說(shuō)明書要求進(jìn)行檢測(cè)，酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值。所得數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，數(shù)據(jù)用X±S表示，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包，采用隨機(jī)單位組析因設(shè)計(jì)方差分析進(jìn)行不同時(shí)間、處理的主效應(yīng)和交互效應(yīng)分析（交互效應(yīng)配合交互輪廓圖）。采用單因素方差分析方法進(jìn)行各時(shí)間，處理單獨(dú)效應(yīng)的分析，多重比較采用SNK法。以P＜0.05有顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1 Ang-Ⅱ檢測(cè)結(jié)果
　　 1.1 Ang-Ⅱ交互效應(yīng)檢測(cè)結(jié)果

7、　　 1.1.1不同時(shí)相檢測(cè)結(jié)果之間有顯著性差異(P＜0.05)，T0 T1時(shí)相檢測(cè)結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），T2 T3 T4時(shí)相檢測(cè)結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），T3 T4 T5時(shí)相檢測(cè)結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余任兩時(shí)相間均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 1.1.2.不同組檢測(cè)結(jié)果之間有顯著性差異（P＜0.05），電擊組、治療組組間檢測(cè)結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組

8、間均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 1.1.3電擊和時(shí)間對(duì)于Ang-Ⅱ檢測(cè)結(jié)果存在交互作用，交互作用后的檢測(cè)結(jié)果之間有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 1.2 Ang-Ⅱ單獨(dú)效應(yīng)檢測(cè)結(jié)果
　　 1.2.1 Ang-Ⅱ組內(nèi)各時(shí)相間檢測(cè)結(jié)果兩兩比較：
　　 1.2.1.1對(duì)照組：組內(nèi)各時(shí)相間濃度值總體比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）
　　 1.2.1.2電擊組：除T0 T1時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯

9、著性差異（P＞0.05），T3、T2、T5，T4時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）1.2.1.3治療組：除T0 T2 T1時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），T2 T1 T4時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），T4T3時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），T3 T5時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.0

10、5）
　　 1.2.2 Ang-Ⅱ檢測(cè)結(jié)果的同時(shí)相組間比較
　　 1.2.2.1 T0時(shí)相：對(duì)照組、電擊組、治療組三組組間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）
　　 1.2.2.2 T1時(shí)相：對(duì)照組、電擊組組間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）
　　 1.2.2.3 T4任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）
　　 1.2.2.4 T3 T

11、5時(shí)相電擊組、治療組組間濃度值比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）
　　 2 sVCAM-1檢測(cè)結(jié)果
　　 2.1 sVCAM-1交互效應(yīng)檢測(cè)結(jié)果
　　 2.1.1不同時(shí)相檢測(cè)結(jié)果之間有顯著性差異（P＜0.05），T4 T5時(shí)相檢測(cè)結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），T5 T1 T3時(shí)相檢測(cè)結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余任兩時(shí)相間均有顯著性差異（P＜0.0

12、5）。
　　 2.1.2不同組檢測(cè)結(jié)果之間有顯著性差異(P＜0.05)，任兩組間均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 2.1.3電擊和時(shí)間對(duì)于Ang-Ⅱ檢測(cè)結(jié)果存在交互作用，交互作用后的檢測(cè)結(jié)果之間有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2.2 sVCAM-1單獨(dú)效應(yīng)檢測(cè)結(jié)果
　　 2.2.1 sVCAM-1組內(nèi)各時(shí)相間檢測(cè)結(jié)果兩兩比較
　　 2.2.1.1對(duì)照組：組內(nèi)各時(shí)相濃度值比較均無(wú)顯著性差

13、異（P＞0.05）
　　 2.2.1.2電擊組：除T5 T1時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），T1 T4 T3時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）
　　 2.2.1.3治療組：除T0 T4時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），T5、T3、T2、T1時(shí)相間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）

14、　　 2.2.2 sVCAM-1檢測(cè)結(jié)果的同時(shí)相組間比較
　　 2.2.2.1 T0時(shí)相：對(duì)照組、電擊組、治療組三組組間濃度值比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）
　　 2.2.2.2 T1、T2、T3、T5時(shí)相：任兩組間比較均有顯著性差異(P＜0.05)
　　 結(jié)論：
　　 1高壓電燒傷早期實(shí)驗(yàn)大鼠血清中Ang-Ⅱ和sVCAM-1的含量均有顯著增加，可作為機(jī)體發(fā)生微循環(huán)障礙的參考指標(biāo)。
　　 2己