高壓電燒傷大鼠Ang-Ⅱ和sVCAM-1變化及已酮可可堿干預(yù)作用.pdf

1、目前電燒傷研究中，已觀察到高壓電燒傷后動物的深筋膜、軟腦膜、胃黏膜、腸黏膜、腸系膜、肝臟、腎皮質(zhì)等多部位發(fā)生微循環(huán)障礙。微血管的功能變化在微循環(huán)障礙的發(fā)生中起到至關(guān)重要的作用。血管緊張素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ，Ang-Ⅱ)可作用于血管平滑肌使血管強烈收縮，同時影響血管內(nèi)皮細胞分泌NO等血管舒張因子，調(diào)節(jié)血管功能變化；血管細胞黏附分子-1（soluble Vascular Cell Adhesion Molecule-1，sVCA

2、M-1）形成與內(nèi)皮細胞激活有關(guān)，可反映血管內(nèi)皮細胞的損傷程度。為此設(shè)計本次實驗，觀察兩者變化探討高壓電燒傷后微循環(huán)障礙發(fā)生機制。
　　 目的：
　　 通過檢測高壓電燒傷前、后及己酮可可堿干預(yù)治療后大鼠血清中Ang-Ⅱ及sVCAM-1的濃度變化，探討高壓電燒傷早期微循環(huán)障礙的發(fā)生機制。
　　 方法：
　　 采用隨機單位組析因設(shè)計。成年健康SD大鼠180只，雌雄不拘，雌鼠未孕，體重320g～380g。隨機分為

3、假高壓電燒傷組（對照組），高壓電燒傷組（電擊組）和高壓電燒傷后己酮可可堿干預(yù)組（治療組），分別于高壓電燒傷前1h、高壓電燒傷或給藥即刻(15min)、高壓電燒傷后1h、2h、4h、8h（分別記錄為T0、T1、T2、T3、T4、T5）6個時相采血檢測血清中Ang-Ⅱ和VCAM-1的含量，每時相10只SD大鼠。1％戊巴比妥鈉溶液（45mg/kg劑量）腹腔注射麻醉，麻醉成功后將大鼠左前肢、右后肢及胸、腹部備皮、脫毛，隨后將脫毛完畢的大鼠仰臥位

4、固定于絕緣臺上，并正確連接線路，左前肢為“電流入口”，右后肢為“電流出口”。調(diào)額定電壓至2KV，通電3s，電流強度為1.83±0.15A。電擊即刻，可見大鼠全身痙攣、僵直，斷電后，立即對大鼠進行適當(dāng)胸外按壓，以保證大鼠心肺功能。電擊后可見“入口”、“出口”深達肌肉、骨骼，其邊緣蒼白、焦黃、炭化.部分動物遠端肢體離斷，高壓電燒傷實驗動物模型復(fù)制成功〔1-4,9〕。治療組大鼠，斷電后即刻(1min)，腹腔注射1％己酮可可堿氯化鈉注射液（50

5、mg/Kg劑量）〔10-14〕；對照組和電擊組注射等量生理鹽水。對照組采用假電方法制作假電燒傷模型。假電方法：實驗前斷開380V電源，確保電路中無電流通過，其余同電擊組電燒傷模型復(fù)制方法。采血方法：打開胸腔，暴露心臟，直視下自心尖部穿刺采血8ml～10ml，分置于PE管中。室溫靜置30min，待血液凝固，以1000×g15min離心，收集血清，置于超低溫冰箱-70℃冷凍保存待用。用Ang-ⅡELSIA試劑盒和sVCAM-1ELSIA試劑

6、盒，按說明書要求進行檢測，酶標儀測定吸光度值。所得數(shù)據(jù)為計量資料，數(shù)據(jù)用X±S表示，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包，采用隨機單位組析因設(shè)計方差分析進行不同時間、處理的主效應(yīng)和交互效應(yīng)分析（交互效應(yīng)配合交互輪廓圖）。采用單因素方差分析方法進行各時間，處理單獨效應(yīng)的分析，多重比較采用SNK法。以P＜0.05有顯著性檢驗水準。
　　 結(jié)果：
　　 1 Ang-Ⅱ檢測結(jié)果
　　 1.1 Ang-Ⅱ交互效應(yīng)檢測結(jié)果

7、　　 1.1.1不同時相檢測結(jié)果之間有顯著性差異(P＜0.05)，T0 T1時相檢測結(jié)果之間無顯著性差異（P＞0.05），T2 T3 T4時相檢測結(jié)果之間無顯著性差異（P＞0.05），T3 T4 T5時相檢測結(jié)果之間無顯著性差異（P＞0.05），其余任兩時相間均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 1.1.2.不同組檢測結(jié)果之間有顯著性差異（P＜0.05），電擊組、治療組組間檢測結(jié)果之間無顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組

8、間均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 1.1.3電擊和時間對于Ang-Ⅱ檢測結(jié)果存在交互作用，交互作用后的檢測結(jié)果之間有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 1.2 Ang-Ⅱ單獨效應(yīng)檢測結(jié)果
　　 1.2.1 Ang-Ⅱ組內(nèi)各時相間檢測結(jié)果兩兩比較：
　　 1.2.1.1對照組：組內(nèi)各時相間濃度值總體比較無顯著性差異（P＞0.05）
　　 1.2.1.2電擊組：除T0 T1時相間濃度值比較無顯

9、著性差異（P＞0.05），T3、T2、T5，T4時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）1.2.1.3治療組：除T0 T2 T1時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），T2 T1 T4時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），T4T3時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），T3 T5時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.0

10、5）
　　 1.2.2 Ang-Ⅱ檢測結(jié)果的同時相組間比較
　　 1.2.2.1 T0時相：對照組、電擊組、治療組三組組間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05）
　　 1.2.2.2 T1時相：對照組、電擊組組間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05）；其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）
　　 1.2.2.3 T4任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）
　　 1.2.2.4 T3 T

11、5時相電擊組、治療組組間濃度值比較無顯著性差異(P＞0.05)；其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）
　　 2 sVCAM-1檢測結(jié)果
　　 2.1 sVCAM-1交互效應(yīng)檢測結(jié)果
　　 2.1.1不同時相檢測結(jié)果之間有顯著性差異（P＜0.05），T4 T5時相檢測結(jié)果之間無顯著性差異（P＞0.05），T5 T1 T3時相檢測結(jié)果之間無顯著性差異（P＞0.05），其余任兩時相間均有顯著性差異（P＜0.0

12、5）。
　　 2.1.2不同組檢測結(jié)果之間有顯著性差異(P＜0.05)，任兩組間均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 2.1.3電擊和時間對于Ang-Ⅱ檢測結(jié)果存在交互作用，交互作用后的檢測結(jié)果之間有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2.2 sVCAM-1單獨效應(yīng)檢測結(jié)果
　　 2.2.1 sVCAM-1組內(nèi)各時相間檢測結(jié)果兩兩比較
　　 2.2.1.1對照組：組內(nèi)各時相濃度值比較均無顯著性差

13、異（P＞0.05）
　　 2.2.1.2電擊組：除T5 T1時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），T1 T4 T3時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）
　　 2.2.1.3治療組：除T0 T4時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），T5、T3、T2、T1時相間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05），其余任兩組間比較均有顯著性差異（P＜0.05）

14、　　 2.2.2 sVCAM-1檢測結(jié)果的同時相組間比較
　　 2.2.2.1 T0時相：對照組、電擊組、治療組三組組間濃度值比較無顯著性差異（P＞0.05）
　　 2.2.2.2 T1、T2、T3、T5時相：任兩組間比較均有顯著性差異(P＜0.05)
　　 結(jié)論：
　　 1高壓電燒傷早期實驗大鼠血清中Ang-Ⅱ和sVCAM-1的含量均有顯著增加，可作為機體發(fā)生微循環(huán)障礙的參考指標。
　　 2己