甲基強(qiáng)的松龍對深低溫停循環(huán)大鼠腦保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:深低溫停循環(huán)技術(shù)(DHCA)自上世紀(jì)50年代誕生以來，已廣泛應(yīng)用于復(fù)雜和嚴(yán)重的先天性心臟病及大血管手術(shù)中，但其可能并發(fā)腦損傷的問題尚未得到較好的解決，深低溫停循環(huán)術(shù)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)病率高達(dá)4％～25％。因此，研究DHCA腦損傷機(jī)制，及如何延長DHCA安全時限就顯得尤為重要。甲基強(qiáng)的松龍(MP)具有減少炎癥病灶周圍免疫細(xì)胞浸潤、促進(jìn)水腫的吸收等多種功效。近年來研究發(fā)現(xiàn)，MP具有抑制深低溫停循環(huán)后腦水腫，炎癥反應(yīng)等腦保護(hù)作用，但其具

2、體作用機(jī)制尚不清楚。本研究采用新的深低溫停循環(huán)大鼠腦損傷模型，分別觀察MP對深低溫停循環(huán)大鼠腦組織NMDAR1蛋白、NMAR1mRNA以及腦含水量、組織超微結(jié)構(gòu)的影響。 方法: 第一部分 深低溫停循環(huán)大鼠腦保護(hù)模型的建立和評價： 雄性SD大鼠30只，隨機(jī)分為3組，即頸動脈阻斷深低溫停循環(huán)組、頸內(nèi)動脈引流深低溫停循環(huán)組和假手術(shù)組。于深低溫停循環(huán)后60min時監(jiān)測腦電圖變化，停循環(huán)60min后恢復(fù)循環(huán)并升溫。所有大鼠

3、于術(shù)后24h處死，并取腦組織測腦含水量。 第二部分 甲基強(qiáng)的松龍對深低溫停循環(huán)大鼠腦NMDAR1蛋白表達(dá)的影響： 采用大鼠DHCA模型。雄性SD大鼠240只，隨機(jī)分為A組(假手術(shù)組)、B組(DHCA模型組)、c組(甲強(qiáng)龍?zhí)幚斫M)。A組16只；B組和C組各112只，每組再分為DHCA后2h、6h、12h、1d、2d、3d、7d共7個小組。觀察甲強(qiáng)龍對DHCA60min，再灌注2h、6h、12h、1d、2d、3d及7d時腦含

4、水量和NMDAR1蛋白表達(dá)的變化。 第三部分 甲基強(qiáng)的松龍對深低溫停循環(huán)大鼠腦NMDAR1 mRNA表達(dá)的影響： 采用大鼠深低溫停循環(huán)(DHCA)模型。雄性SD大鼠144只，隨機(jī)分為A組(假手術(shù)組)、B組(DHCA模型組)、C組(甲強(qiáng)龍?zhí)幚斫M)。觀察DHCA60min，再灌注2h、6h、12h、1d、2d、3d時NMDAR1mRNA表達(dá)的變化以及腦組織超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果: 第一部分 頸內(nèi)動脈引流DHCA

5、組大鼠α波相對功率值明顯低于頸動脈阻斷DHCA組(P<0.01)，而且兩組大鼠α波相對功率值均明顯低于假手術(shù)組(P<0.01)；頸內(nèi)動脈引流DHCA組大鼠θ波相對功率值明顯低于頸動脈阻斷DHCA組和假手術(shù)組(P<0.01)，而后兩組大鼠θ波相對功率值無差異。腦含水率結(jié)果顯示頸內(nèi)動脈引流DHCA組大鼠腦含水量高于頸動脈阻斷DHCA組(P<0.01)。 第二部分 B組和C組大鼠在深低溫停循環(huán)再灌注6h起出現(xiàn)腦水腫，到24h水腫到達(dá)高

6、峰，于3d后逐漸恢復(fù)至正常水平，其中C組在12h、1d、2d水腫明顯低于B組(P<0.01)。免疫組化結(jié)果顯示，DHCA再灌注2h起，B組和C組大鼠NMDAR1蛋白開始升高，于1d到達(dá)高峰，后逐漸降低，于再灌注7d恢復(fù)至正常水平。C組大鼠再灌注后2h、6h、12h、ld、2d五個時間點(diǎn)NMDAR1表達(dá)明顯低于B組(P<0.05)。 第三部分 假手術(shù)組NMDARlmRNA呈基礎(chǔ)水平表達(dá)。甲基強(qiáng)的松龍組NMDAR1mRNA表達(dá)量與模

7、型組相比，在各時相點(diǎn)均顯著降低(P<0.01)。腦組織超微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)甲基強(qiáng)的松龍能抑制DHCA腦細(xì)胞凋亡。 結(jié)論: (1)頸內(nèi)動脈引流深低溫停循環(huán)模型較頸動脈阻斷深低溫停循環(huán)模型腦缺血更完全，是一種更為理想的深低溫停循環(huán)大鼠腦保護(hù)模型。 (2)甲基強(qiáng)的松龍對DHCA大鼠腦組織具有保護(hù)作用，其對NMDAR1蛋白表達(dá)的抑制作用可能是其腦保護(hù)作用的重要機(jī)制。 (3)甲基強(qiáng)的松龍可能通過下調(diào)NMDAR1mRNA