白介素17(IL-17)在大腸埃希菌誘導(dǎo)的新生大鼠敗血癥中的意義.pdf

1、目的：新生兒敗血癥是新生兒常見的臨床重癥感染之一，易感性高，且死亡率也高。目前大多數(shù)研究認(rèn)為，敗血癥是機(jī)體釋放大量炎癥介質(zhì)導(dǎo)致的急性炎癥反應(yīng)綜合征。固有免疫被認(rèn)為是一種天然免疫防御功能，它是機(jī)體在長期種系發(fā)育與進(jìn)化過程中逐漸形成的。單核一巨噬細(xì)胞、γδT細(xì)胞、NKT細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)主要成分，它們能吞噬、消除、釋放各種細(xì)胞因子或炎性介質(zhì)，識(shí)別、遞呈抗原，啟動(dòng)特異性免疫應(yīng)答，這些先天免疫細(xì)胞在炎癥反應(yīng)中的作用極其重要，影響到疾病的轉(zhuǎn)歸與預(yù)

2、后。IL-17是γδT細(xì)胞、NKT細(xì)胞等分泌的細(xì)胞因子，在感染性炎癥反應(yīng)中能夠誘導(dǎo)介導(dǎo)防御反應(yīng)的IL-6、IL-1β、TNF-α等促炎因子，起到促炎作用。而血紅蛋白清道夫受體(CD163)分子特異性的存在于單核一巨噬細(xì)胞的表面，能介導(dǎo)脂多糖(LPS)的內(nèi)吞和抗炎因子的產(chǎn)生，其還可脫落至血循環(huán)，成為血漿中CD163(sCD163)，發(fā)揮抗炎和免疫調(diào)節(jié)等作用。本課題組既往研究證實(shí)在大腸埃希菌誘導(dǎo)的新生大鼠敗血癥模型中，CD163和sCD16

3、3發(fā)揮抗炎作用，在敗血癥發(fā)生、發(fā)展中具有重要意義。鑒于此，我們?cè)诖嘶A(chǔ)上建立新生大鼠大腸埃希菌敗血癥模型，分析細(xì)胞因子IL-17在肺、肝組織中的表達(dá)以及血漿中水平的變化，來探討IL-17在新生大鼠敗血癥中的作用及機(jī)制，進(jìn)一步了解淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IL-17和巨噬細(xì)胞表面CD163在炎癥反應(yīng)中的作用，通過其表達(dá)水平的變化了解機(jī)體的免疫狀況。
　　 方法：選用7日齡無特定病原體(SPF級(jí))的Sprague-Dawley(SD)大

4、鼠84只，雌雄不限，質(zhì)量16-20g，分為兩組，即對(duì)照組和敗血癥組，每組42只。所有動(dòng)物按照隨機(jī)原則分入實(shí)驗(yàn)后第2、4、6、8、12、24、48小時(shí)7個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)均為6只新生SD大鼠。敗血癥組采用腹腔注射大腸埃希菌(E.coli)方法來建立新生大鼠敗血癥模型；對(duì)照組則用采用腹腔注射等量生理鹽水的方法來建立新生大鼠對(duì)照組模型。對(duì)照組和敗血癥組分別于設(shè)定的七個(gè)時(shí)間點(diǎn)麻醉動(dòng)物，心臟采血，取肺臟和肝臟固定于福爾馬林中備用。用ELISA檢

5、測方法檢測血漿中IL-17在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的水平，用免疫組織化學(xué)分析的方法檢測肺組織、肝組織IL-17的表達(dá)。
　　 結(jié)果：1．對(duì)照組新生大鼠血漿中IL-17和肺組織、肝組織IL-17各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)水平均無顯著性差異(P＞0.05)；2．?dāng)⊙Y組新生大鼠血漿中IL-17的表達(dá)水平，隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延長而逐漸升高，至12小時(shí)左右達(dá)高峰，一直延續(xù)到48小時(shí)；3．?dāng)⊙Y組新生大鼠肺組織中IL-17的表達(dá)，隨著時(shí)實(shí)驗(yàn)間的延長，于12小時(shí)左右達(dá)到

6、高峰，實(shí)驗(yàn)至48小時(shí)一直處于較高水平；4．?dāng)⊙Y組新生大鼠肝組織IL-17的表達(dá)，在實(shí)驗(yàn)至4小時(shí)，肝組織中IL-17水平較高，隨后水平稍下降，但實(shí)驗(yàn)至12小時(shí)左右再次達(dá)到較高的水平，至實(shí)驗(yàn)48小時(shí)一直維持在較高水平；5．實(shí)驗(yàn)進(jìn)展至2小時(shí)，敗血癥組新生大鼠血漿中IL-17水平和肺組織、肝組織中IL-17的表達(dá)分別與對(duì)照組比較均無顯著性差異(P＞0.05)；實(shí)驗(yàn)進(jìn)展至4小時(shí)始，敗血癥組新生大鼠血漿中IL-17水平和肺組織、肝組織中IL-17

7、的表達(dá)分別高于對(duì)照組水平，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：1、新生大鼠大腸埃希菌敗血癥過程中，隨著實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展，敗血癥組血漿中IL-17水平和肺組織、肝組織IL-17的表達(dá)量與對(duì)照組相比存在明顯差異，提示IL-17在敗血癥中發(fā)揮重要作用。2、敗血癥組新生大鼠血漿中IL-17水平和肺組織、肝組織IL-17的表達(dá)量隨著感染的進(jìn)展，呈時(shí)間依賴性的升高，提示機(jī)體的促炎癥反應(yīng)加劇。3、課題組既往研究發(fā)現(xiàn)，在新生大鼠大腸埃