IL-17在泡球蚴感染大鼠肝移植免疫中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：（1）建立穩(wěn)定的泡球蚴感染大鼠肝移植(ROLT)模型，觀察肝移植術(shù)后實驗組（E.m+-ROLT）與對照組（E.m--ROLT）的生存時間，檢測肝功能，病理分析移植肝排斥情況，探討泡球蚴感染免疫與肝移植免疫的關(guān)系。（2）檢測受體血清IL-17細(xì)胞因子表達(dá)，肝移植物中IL-17蛋白及IL-17 mRNA的表達(dá)情況，初步探明Th17型細(xì)胞因子(IL-17)在泡球蚴感染大鼠肝移植模型中的表達(dá)及其意義。
　　方法：（1）以Lewis（

2、LEW）大鼠為供體，Brown Norway（BN）大鼠為受體，采用二袖套法建立大鼠肝移植（ROLT）模型。實驗組（E.m+-ROLT）肝移植受體BN大鼠皮下接種泡球蚴，對照組（E.m--ROLT）BN大鼠未皮下接種泡球蚴。觀察肝移植術(shù)后兩組受體的生存時間，（2）術(shù)后第7天隨機(jī)處死14只受體大鼠，下腔靜脈取靜脈血5mL，取兩份肝臟組織，分別液氮冷凍保存和中型福爾馬林固定。（3）分別檢測兩組受體鼠的肝功（ALT、AST和T-BIL），肝組

3、織病理，分析排斥情況。ELISA檢測血清IL-17、IL-23、TGF-β表達(dá)，免疫組化檢測肝IL-17表達(dá)，real-time RT-qPCR檢測肝IL-17mRNA表達(dá)，分析兩組Th17型細(xì)胞因子(IL-17)的表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）泡球蚴皮下感染成功率為85.0％(34/40只)。（2）肝移植術(shù)后實驗組（E.m+-ROLT）組和對照組（E.m--ROLT）的生存時間分別為24天和11.5天。（3）兩組ALT表達(dá)都升高，但二

4、者差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），兩組均出現(xiàn) AST和T-BIL升高，對照組（E.m--ROLT）高于實驗組（E.m+-ROLT），兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均 P<0.05）。（4）對照組（E.m--ROLT）在第7天出現(xiàn)強(qiáng)烈排斥，而實驗組（E.m+-ROLT）則排斥不是很明顯，兩組 Banff97 RAI評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），評分分別為7.67±1.03和5.50±1.28。（5）在肝移植術(shù)后第7天，IL-17在實驗組

5、（E.m+-ROLT）和對照組（E.m--ROLT）兩組的表達(dá)用不同檢測：1)免疫組化評分為：2.33±1.37和5.00±2.10，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05。2)ELISA檢測為：（16.52±6.41）pg/mL和（28.07±8.43）pg/mL，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05。3)real-time RT-PCR檢測，IL-17/β-actin相對表達(dá)量為：0.65±0.27和0.99±0.41，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)

6、意義。（6）血清表達(dá)IL-23水平為實驗組（E.m+-ROLT）：（422.48±54.47）pg/mL，明顯低于對照組（E.m--ROLT）：（685.18±31.42）pg/mL，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。（7）血清表達(dá)TGF-β水平為實驗組（E.m+-ROLT）：（8.42±2.04）ng/mL，明顯低于對照組（E.m--ROLT）：（7.67±1.44）ng/mL，但二者差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。
　　結(jié)論：