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文檔簡介
1、目的:探討Th17及白介素21(interleukin21,IL-21)因子在肺間質(zhì)纖維化發(fā)病機制中的表達及意義。
方法:
1、實驗分組:本實驗采用由大連醫(yī)科大學動物部提供SPF級SD大鼠64只,雌雄各半,體重(210±20)g,將72只大鼠隨機分為3組:博來霉素制造的間質(zhì)纖維化肺模型組(P組)24只,地塞米松注射液3mg/kg干預組(D組)24只,0.9%氯化鈉注射液對照組(N組)24只。
2、模型制備:
2、應用一次性氣管內(nèi)注射博來霉素(Bleomycin,BLM)(5mg/Kg)方法建立SD大鼠間質(zhì)纖維化肺模型,P、D組均應用一次性氣管內(nèi)注射博來霉素(Bleomycin,BLM)(5mg/Kg)方法建立SD大鼠間質(zhì)纖維化肺模型,N組氣管內(nèi)灌注等量0.9%氯化鈉注射液。D組在7天開始腹腔注射地塞米松注射液1次/日;N、P組在腹腔內(nèi)注射等量0.9%氯化鈉注射液作為對照。N、P、D三組大鼠于第7、14、28天每組隨機分批處死大鼠(8只/組),取
3、肺組織。
3、評價:通過大鼠肺組織形態(tài)學,病理學觀察,及測定SD大鼠肺組織中羥脯氨酸(HYP)含量,評價模型制備成功與否。
4、檢測指標:采用熒光RT-PCR法測定IL-21的表達水平;用流式細胞術測定肺組織中Th17占CD4+T細胞的比例;分析IL-21及Th17在肺纖維化中的作用。
結(jié)果:
1、根據(jù)對大鼠肺組織形態(tài)學、病理學觀察,氣管內(nèi)注射博來霉素導致大鼠間質(zhì)纖維化肺模型制備成功。
4、2、P組中,肺組織中IL-21表達水平及Th17占CD4+T細胞的比例均較高,與對照組(N組)相比,差異顯著(p<0.05)。
3、D組中,肺組織中IL-21表達水平及TH17占CD4+T細胞的比例均較高,與N組相比,差異顯著(p<0.05)。
4、P組中,肺組織中IL-21表達水平及Th17占CD4+T細胞的比例均較高,與D組相比,差異顯著(p<0.05)。
結(jié)論:Th17及IL-21因子可能在大鼠間質(zhì)纖
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