PCR及熒光定量PCR方法鑒別飼料中鵝源性成分的研究.pdf

1、食品安全成為當(dāng)代消費(fèi)者最為關(guān)心的事之一，人們關(guān)心食品，包括動(dòng)物性食品中的殘留成分，更關(guān)心動(dòng)物飼料在食品安全中的安全性。針對(duì)目前我國(guó)畜禽類肉食品和飼料市場(chǎng)貿(mào)易中畜禽源性成分檢驗(yàn)檢疫中的迫切需要，本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)鵝線粒體DNA的D-Loop區(qū)E1部位基因進(jìn)行研究，運(yùn)用PCR及熒光定量PCR方法成功建立了飼料中鵝源性成分的PCR檢測(cè)技術(shù)，通過使用DNA Star、DNAMAN和Primer Premier5．0等軟件設(shè)計(jì)出一對(duì)特異性引物P7P8，

2、可以專一地從樣品的DNA模板中擴(kuò)增到鵝的mtDNA片段，而不能從其他動(dòng)物組織樣品中擴(kuò)增出PCR產(chǎn)物，檢出限為0．1g/kg；本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的用于熒光PCR的引物擴(kuò)增目的基因經(jīng)測(cè)序后，產(chǎn)物序列與Genebank公布的鵝D-loop區(qū)序列有98%的同源性，經(jīng)實(shí)際應(yīng)用證明該方法可以用于飼料或食品中鵝源性成分的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)通過對(duì)熒光PCR反應(yīng)體系和循環(huán)參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，建立了利用SYBR GreenⅡ熒光PCR檢測(cè)鵝源性成分的一種新方法。特異性、靈敏度