辛伐他汀醇質(zhì)體凝膠的制備及其體外釋放研究.pdf

1、目的:
　　 將調(diào)血脂藥辛伐他汀制備成醇質(zhì)體凝膠制劑,通過皮膚給藥,避免肝臟首過效應(yīng),增加辛伐他汀的生物利用度,降低肝臟負(fù)擔(dān)。
　　 方法:
　　 (1)HPLC法進(jìn)行辛伐他汀的含量測定。采用安捷倫1200液相色譜儀(G1314B紫外檢測器,G1314A泵,Rev.B.04.02[98]色譜工作站),以0.025 mol/L的PBS(pH4.5)-乙腈(65∶35)為流動相,C18柱(250 mm×4.60mm,

2、5μm)為色譜柱,檢測波長238nm。
　　 (2)注入法制備辛伐他汀醇質(zhì)體,透析法測定辛伐他汀醇質(zhì)體的包封率。由單因素實(shí)驗(yàn)考察確定各因素的大致水平范圍,采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化處方,以包封率的測定結(jié)果進(jìn)行極差分析,得到最優(yōu)處方。以最優(yōu)處方制備醇質(zhì)體進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)。
　　 (3)卡波姆為基質(zhì)制備凝膠劑并進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)。體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)采用ZTY智能透皮擴(kuò)散儀,以辛伐他汀凝膠(制劑Ⅰ)為對照,比較含1%、3%薄荷腦的辛伐他

3、汀凝膠(制劑Ⅱ、制劑Ⅲ)、辛伐他汀醇質(zhì)體凝膠(制劑Ⅳ)在離體小鼠皮膚中的滲透行為,以單位面積累積滲透量,皮膚中辛伐他汀滯留量為考察指標(biāo),客觀評價(jià)各制劑的透皮滲透行為。
　　 (4)測定空白凝膠、辛伐他汀醇質(zhì)體凝膠的皮膚刺激性。急性皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)在給新西蘭白兔涂抹受試物后1、24、48、72 h分別觀察皮膚的紅斑和水腫情況并打分;多次皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)連續(xù)涂抹受試物14天,每天涂抹前觀察紅斑水腫情況并打分,按得分進(jìn)行刺激性分級。實(shí)驗(yàn)后

4、的皮膚進(jìn)行病理切片,在顯微鏡下觀察皮膚的病理結(jié)構(gòu)變化情況。
　　 結(jié)果:
　　 (1)辛伐他汀與洛伐他汀分離度大于4;辛伐他汀在濃度0.5μg·mi-～20μg·ml-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,R2=1;在1.0、5.0、10μg·ml-1三個(gè)濃度下的精密度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.69%、0.14%、0.11%;以20μg·ml-1的辛伐他汀溶液間隔進(jìn)樣,在4 d中穩(wěn)定性良好,RSD為1.75%;在1.0、5.0、10μg·m

5、l-1三個(gè)添加水平下,在空白醇質(zhì)體透析介質(zhì)中的平均回收率為97.37%～101.23%,在透皮接收介質(zhì)中的平均回收率為93.73%～96.00%。
　　 (2)辛伐他汀醇質(zhì)體的最優(yōu)處方為:每10 ml中含大豆卵磷脂0.15 g,乙醇4.6ml,膽固醇2 mg,聚氧乙烯氫化蓖麻油50 mg,pH7.0的PBS(磷酸二氫鉀緩沖液)5.4 ml。透射電鏡下觀察醇質(zhì)體粒子近似圓形;平均粒徑為52.4±3.91 nm;透析法測得平均包封率

6、為(74.40±3.6)%;在離心,高溫,高濕及強(qiáng)光照射實(shí)驗(yàn)后,辛伐他汀醇質(zhì)體保持穩(wěn)定,在4℃及室溫放置12個(gè)月后醇質(zhì)體混懸液外觀上沒有明顯的變化。
　　 (3)制備的凝膠劑性狀良好且穩(wěn)定。體外經(jīng)皮滲透性實(shí)驗(yàn)中,與制劑Ⅰ相比,制劑Ⅱ的單位面積累積滲透量在8 h開始顯著升高(P＜0.05),制劑Ⅲ、制劑Ⅳ從4h開始顯著升高(P＜0.05);制劑Ⅳ的單位面積累積滲透量自4 h開始顯著高于制劑Ⅱ(P＜0.05)和制劑Ⅲ(P＜0.05)

7、;四種制劑的單位面積累積滲透量對時(shí)間回歸,在2～8 h符合線性方程,在8～24 h符合higuchi方程。制劑Ⅱ、制劑Ⅲ、制劑Ⅳ的皮內(nèi)滯留量顯著高于制劑Ⅰ(P＜0.05)。
　　 (4)辛伐他汀醇質(zhì)體凝膠和空白凝膠對皮膚無急性刺激,多次皮膚的刺激也在輕度范圍內(nèi);在多次皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)的過程中一度出現(xiàn)過紅斑,但是隨著用藥時(shí)間的推移,皮膚出現(xiàn)了可逆的變化,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的皮膚趨于正常狀態(tài)。病理學(xué)切片觀察結(jié)果可見皮膚的角質(zhì)層未出現(xiàn)明顯異常,

8、角化過度或角化不全的狀況未出現(xiàn),基底層未見增厚、液化等病變,棘層未見增厚、變薄等病變,即表皮各層結(jié)構(gòu)完整,未見明顯病變;真皮層組織未見水腫及炎癥反應(yīng);毛囊、毛束等皮下附屬器官未見明顯病變。
　　 結(jié)論:
　　 HPLC法測定辛伐他汀的含量,分離度、專屬性、線性、精密度、穩(wěn)定性、回收率均達(dá)到測定的要求,適合于辛伐他汀的含量測定;按照優(yōu)化處方制備的醇質(zhì)體外觀狀態(tài)良好,粒徑、包封率、穩(wěn)定性均在較理想的水平;辛伐他汀醇質(zhì)體凝膠的