昆明山海棠提取物防治小鼠移植物抗宿主病的研究.pdf

1、目的：探討昆明山海棠(THH)提取物對(duì)小鼠異基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)的防治作用及機(jī)制。 方法：BALB/c受鼠清髓性預(yù)處理后輸注C57BL/6供鼠的骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞混合液，隨機(jī)分為4組：對(duì)照組、CsA組、THH組、THH+CsA聯(lián)藥組。觀察移植后GVHD發(fā)生情況和受鼠嵌合體植入情況，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定受鼠外周血CD3<'+>CD4<'+>、CD3<'+>CD8<'+>和CD4<'+>CD25<'+>T細(xì)胞的百分率，E

2、LISA法檢測(cè)受鼠血漿IFN-γ、IL-4、IL-10濃度，實(shí)時(shí)定量熒光PCR方法檢測(cè)受鼠脾細(xì)胞內(nèi)Foxp3 mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果：①CsA組、THH組、聯(lián)藥組受鼠生存時(shí)間均長(zhǎng)于對(duì)照組(P<0．05)；②CsA組、THH組、聯(lián)藥組GVHD臨床表現(xiàn)和病理改變均比對(duì)照組輕；③對(duì)照組、CsA組、THH組、聯(lián)藥組受鼠骨髓細(xì)胞異基因H-2<'b>百分率均>95％；④與對(duì)照組相比，CsA組、THH組、聯(lián)藥組受鼠移植后外周血CD3<'+

3、>CD4<'+>、CD3<'+>CD8<'+>細(xì)胞百分比均下降(P<0．05)，CD4<'+>/CD8<'+>細(xì)胞比例均上升，聯(lián)藥組變化最明顯(P<0．05)；⑤+10d時(shí)CsA組、THH組、聯(lián)藥組CD4<'+>CD25<'+>T細(xì)胞數(shù)量開(kāi)始增加，+15d達(dá)高峰，之后開(kāi)始下降，至+30d時(shí)聯(lián)藥組仍維持較高水平；⑥CsA組、THH組、聯(lián)藥組受鼠血漿IFN-γ的濃度明顯低于對(duì)照組(P<0．05)，聯(lián)藥組下降最明顯；IL-4濃度無(wú)明顯變化；I

4、L-10濃度高于對(duì)照組(P<0．05)，聯(lián)藥組上升最明顯；⑦CsA組、THH組、聯(lián)藥組受鼠脾細(xì)胞內(nèi)Foxp3 mRNA表達(dá)水平在+15d達(dá)高峰，聯(lián)藥組最高，之后逐漸下降，聯(lián)藥組下降最緩慢，+30d時(shí)仍維持較高水平。 結(jié)論：THH可用于異基因移植受鼠GVHD的防治，THH與CsA小劑量聯(lián)合應(yīng)用有協(xié)同作用，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)受鼠體內(nèi)T細(xì)胞亞群比例，調(diào)節(jié)Th1/Th2類(lèi)細(xì)胞因子比例，上調(diào)CD4<'+>CD25<'+>細(xì)胞比例及Foxp3