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文檔簡(jiǎn)介
1、采用乙醇冷浸法從15科18種植物中提取殺蟲活性物質(zhì)對(duì)二斑葉螨雌成螨和卵進(jìn)行生物活性測(cè)定。經(jīng)過一系列的殺螨活性研究,從中篩選出殺螨活性最好的植物—臭椿;對(duì)臭椿提取物進(jìn)行了系統(tǒng)的生物活性測(cè)定;采用活性跟蹤法,對(duì)臭椿中的殺螨活性成分進(jìn)行了分離,從而為安全、環(huán)保的植物源殺螨劑的研制奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
1.殺螨植物的初步篩選
本試驗(yàn)采用乙醇冷浸法從15科18種植物中提取植物提取物,通過玻片浸漬法和葉片浸漬法對(duì)二斑葉螨
2、的雌成螨和卵進(jìn)行生物活性測(cè)定,結(jié)果發(fā)現(xiàn),處理一段時(shí)間后18種植物乙醇提取物均對(duì)二斑葉螨雌成螨和卵表現(xiàn)出一定的生物活性。其中,紫茉莉、臭椿、雞爪槭、紫花地丁、牛膝菊和藜這六種植物提取物對(duì)二斑葉螨雌成螨的殺螨活性較強(qiáng),在10 mg/mL時(shí)其72h校正死亡率均為100%。對(duì)卵的生物活性較其余12種植物提取物高但不如對(duì)雌成螨的生物活性強(qiáng)。測(cè)定了紫茉莉、臭椿、雞爪槭、紫花地丁、牛膝菊和藜這六種植物乙醇提取物對(duì)二斑葉螨雌成螨和卵的室內(nèi)毒力,這六種植
3、物提取物對(duì)雌成螨的LC50在3.679和7.378 mg/mL之間,對(duì)卵的LC50在11.176和60.651 mg/mL之間,毒力較強(qiáng)。綜合比較六種植物提取物對(duì)害螨雌成螨和卵的生物活性及毒力,發(fā)現(xiàn)臭椿乙醇提取物的殺螨活性最好。
2.臭椿提取物的殺螨活性
本試驗(yàn)選取了石油醚、丙酮、氯仿和乙醇這四種極性不同的溶劑對(duì)臭椿進(jìn)行了室內(nèi)平行提取,得到4種溶劑提取物。在這四種溶劑中提取率最高的是乙醇,其次為丙酮、氯仿和石油醚,這
4、說明臭椿中極性成分含量較高。采用室內(nèi)玻片浸漬法和葉片浸漬法分別測(cè)定了這四種溶劑提取物對(duì)二斑葉螨雌成螨和卵的生物活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn):石油醚、丙酮、氯仿和乙醇這4種溶劑提取物對(duì)害螨雌成螨處理24h后的校正死亡率分別為51.22%、64.63%、36.59%、88.10%;處理48h時(shí)校正死亡率分別為62.50%、88.75%、78.75%和96.15%;7d內(nèi)卵的孵化率分別為92.22%、91.11%、81.11%和51.11%。臭椿乙醇提取物
5、對(duì)害螨雌成螨和卵的生物活性較高,故后續(xù)實(shí)驗(yàn)中的最佳提取溶劑為乙醇。隨后利用臭椿乙醇提取物對(duì)二斑葉螨雌成螨進(jìn)行了殺螨活性研究:臭椿乙醇提取物對(duì)二斑葉螨雌成螨表現(xiàn)出較強(qiáng)的產(chǎn)卵抑制作用,當(dāng)濃度為12.8 mg/mL時(shí),其產(chǎn)卵抑制指數(shù)在24h和48h時(shí)分別為0.9883和0.9933,產(chǎn)卵抑制率分別達(dá)到99.40%和99.66%;臭椿乙醇提取物對(duì)害螨也表現(xiàn)出較強(qiáng)的驅(qū)避作用,當(dāng)濃度為6.4 mg/mL和12.8 mg/mL時(shí)處理12h后驅(qū)避率分別
6、達(dá)到86.67%和100%;在測(cè)定臭椿乙醇提取物對(duì)害螨雌成螨觸殺活性時(shí)發(fā)現(xiàn)處理72h后,0.8 mg/mL溶液對(duì)害螨的校正死亡率超過了50%,這也表明臭椿乙醇提取物對(duì)害螨有較強(qiáng)的觸殺作用。
3.臭椿殺螨活性成分的追蹤分離
通過不同極性溶劑液-液萃取法、柱色譜層析法和薄層層析分離技術(shù)對(duì)臭椿乙醇提取物進(jìn)行了活性成分分離,在室內(nèi)測(cè)定了不同分離組分對(duì)二斑葉螨雌成螨的生物活性。臭椿乙醇提取物在水相中萃取率最高(51.30%),
7、其次為正丁醇相(27.60%)、乙酸乙酯相(11.50%)和石油醚相(9.60%)。采用微量進(jìn)樣器定量點(diǎn)滴法進(jìn)行生物活性測(cè)定,處理24h后正丁醇相殺螨活性最強(qiáng)(44.94%),乙酸乙酯相和水相次之(20.22%和17.98%),石油醚相最弱(4.49%);處理72h后正丁醇相對(duì)害螨的校正死亡率達(dá)到100%,乙酸乙酯相其次(97.33%),石油醚相最弱(69.33%)。測(cè)定了正丁醇相對(duì)二斑葉螨雌成螨和卵的毒力,最終確定臭椿有效成分主要存在
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