中國(guó)首例產(chǎn)NDM-1陰溝腸桿菌感染病例研究.pdf

1、隨著碳青霉烯類抗生素在臨床上廣泛使用，耐碳青霉烯類抗生素的致病菌逐漸增加。致病菌產(chǎn)碳青霉烯酶是碳青霉烯類耐藥的主要機(jī)制。碳青霉烯酶是指能夠明顯水解亞胺培南或美羅培南等碳青霉烯類抗生素的一類β-內(nèi)酰胺酶，包括Ambler分子結(jié)構(gòu)分類的A、B、D三類酶，其中B類為金屬酶MBLs，其催化活性依賴Zn2+，能滅活青霉素類、頭孢菌素類和碳青霉烯類抗生素，對(duì)氨曲南無水解活性，可被EDTA等金屬螯合劑抑制。MBLs有IMP、VIM、SPM-1、GIM

2、-1、SIM-1、AIM-1、DIM-1、TMB-1、KHM-1和NDM-1等基因型，主要分布于銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌屬和腸桿菌科等臨床常見病原菌中。耐藥基因可通過質(zhì)?；蛘献釉诓煌?xì)菌間水平擴(kuò)散。首例產(chǎn)NDM-1的肺炎克雷伯菌(KP05-506)和大腸埃希菌(NF-NDM-1)于2008年報(bào)道后，這種耐藥菌以驚人的速度向全球蔓延。歐洲、亞洲、南北美洲、拉丁美洲、澳大利亞相繼報(bào)道了攜帶NDM-1基因的細(xì)菌。目前中國(guó)大陸已報(bào)道的產(chǎn)NDM-

3、1的細(xì)菌有屎腸球菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、臭鼻克雷伯菌，而產(chǎn)NDM-1的陰溝腸桿菌僅在印度地區(qū)發(fā)現(xiàn)，我國(guó)大陸地區(qū)未見報(bào)道。
　　 目的:對(duì)重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2007年1月至2012年2月臨床分離的陰溝腸桿菌進(jìn)行碳青霉烯類敏感性篩查，發(fā)現(xiàn)1株產(chǎn)NDM-1的陰溝腸桿菌。為進(jìn)一步了解該菌株感染的特點(diǎn)，本研究重點(diǎn)分析了該菌株的臨床特點(diǎn)、耐藥性和耐藥機(jī)制。
　　 方法:常規(guī)分離菌株，采用紙片擴(kuò)散法和瓊脂稀釋法進(jìn)行不同抗

4、菌藥物敏感性試驗(yàn)，改良Hodge試驗(yàn)和Etest MBL確認(rèn)紙條法表型篩查金屬β-內(nèi)酰胺酶，PCR擴(kuò)增金屬β-內(nèi)酰胺酶基因型，接合試驗(yàn)分析質(zhì)粒攜帶NDM-1基因的轉(zhuǎn)移，PFGE鑒定產(chǎn)NDM-1金屬酶的陰溝腸桿菌類型。Southern blotting進(jìn)行blaNDM-1基因定位。
　　 結(jié)果:臨床分離299株陰溝腸桿菌發(fā)現(xiàn)14株對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥，其中6株產(chǎn)碳青霉烯酶，PCR證實(shí)1株分離自一名67歲女性肺炎患者痰液中的E.c

5、loacae413攜帶有blaNDM-1基因。E.cloacae413體外藥敏試驗(yàn)僅對(duì)多粘菌素B和磷霉素敏感，該菌株P(guān)FGE分型屬B型。其攜帶的blaNDM-1基因位于大小約20 Kb的質(zhì)粒上，該質(zhì)粒上還同時(shí)攜帶有blaCTX-M-14，qnrA，qnrS, aac6' Ib-cr，rmtA多種耐藥基因，這些耐藥基因可隨質(zhì)粒在不同的細(xì)菌間轉(zhuǎn)移，使得接合子E.coli J53(PNDM-1)同E.cloacae413一樣對(duì)β-內(nèi)酰胺酶類、