對碳青霉烯類抗生素不敏感腸桿菌科細(xì)菌NDM-1基因分析.pdf

1、目的:了解我院臨床分離的對碳青霉烯類抗生素不敏感的腸桿菌科細(xì)菌感染患者的臨床特征，對常用抗菌藥物的耐藥性，明確產(chǎn)碳青霉烯酶表型和NDM-1基因型檢出情況。
　　方法:收集我院2013年4月到2014年3月臨床分離的對碳青霉烯類抗生素不敏感的腸桿菌科細(xì)菌作為研究對象。采用改良Hodge試驗檢測細(xì)菌是否產(chǎn)碳青霉烯酶，雙紙片協(xié)同試驗篩查金屬β-內(nèi)酰胺酶。對高度耐藥的腸桿菌科細(xì)菌利用特異性引物進(jìn)行NDM-1基因PCR擴(kuò)增，采用雙脫氧末端終

2、止法進(jìn)行DNA測序，所測序列與GenBank基因庫中的已知序列進(jìn)行BLAST比對，以明確所測細(xì)菌的基因型。
　　結(jié)果:
　　1.菌株分布情況：我院2013年4月到2014年3月臨床標(biāo)本中分離出30株對碳青霉烯類抗生素不敏感的腸桿菌科細(xì)菌，其中肺炎克雷伯菌16株，占53.3％；陰溝腸桿菌12株，占40.0%；弗勞地枸櫞酸桿菌和布氏枸櫞酸桿菌各1株。這些細(xì)菌來自不同的科室，但主要分布在重癥醫(yī)學(xué)科15株（50.0%），神經(jīng)內(nèi)科重癥

3、病房8株（26.7%），其次為普通外科4株（13.3%），神經(jīng)內(nèi)科、呼吸內(nèi)科和康復(fù)科各1株。標(biāo)本主要來源于痰20株，占66.7%，其次為尿液5株（16.7%），血液4株（13.3%），引流液1株（3.3%）。
　　2.藥物敏感性試驗結(jié)果：30株細(xì)菌對氨芐西林、頭孢菌素類、含β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合制劑和單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥率最高，均為100%；對碳青霉烯類抗生素亞胺培南和美洛培南的耐藥率分別為100%和86.7%；對四環(huán)素

4、、氯霉素、慶大霉素、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星的耐藥率在66.7%～93.3%之間；對多粘菌素最敏感，敏感率高達(dá)100%，其次為復(fù)方新諾明和阿米卡星，敏感率分別為66.7%和46.7%。
　　3.表型確認(rèn)結(jié)果：30株細(xì)菌中，26株改良Hodge試驗陽性，即檢出產(chǎn)碳青霉烯酶細(xì)菌26株，陽性率為86.7%（26/30）；18株雙紙片協(xié)同試驗陽性，即檢出產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌18株，陽性率為60.0%（18/30）。
　　4.NDM-1

5、基因確證結(jié)果：對高度耐藥的腸桿菌科細(xì)菌進(jìn)行NDM-1基因確證，共有5株為產(chǎn)NDM-1菌株。5株菌包括肺炎克雷伯菌2株，陰溝腸桿菌2株，布氏枸櫞酸桿菌1株；其中分布在重癥醫(yī)學(xué)科3株，神經(jīng)內(nèi)科重癥病房2株；3株分離自患者尿液，2株分離自患者痰。5株細(xì)菌對多粘菌素均敏感，3株對復(fù)方新諾明敏感，2株對阿米卡星敏感；而對常見的β-內(nèi)酰胺類抗生素以及喹諾酮類、四環(huán)素類、氯霉素類等非β-內(nèi)酰胺類抗生素均耐藥。5株產(chǎn)NDM-1菌株改良Hodge試驗以及

6、雙紙片協(xié)同試驗結(jié)果均為陽性。
　　5.感染患者臨床特征：30株腸桿菌科細(xì)菌分離自28例患者。28例細(xì)菌感染患者平均年齡約為74歲，多有較嚴(yán)重的呼吸道疾病，心腦血管疾病，嚴(yán)重外傷，重癥感染等基礎(chǔ)疾病，平均住院時間8個月。其中5株產(chǎn)NDM-1菌株分離自4例患者，感染患者平均年齡為73歲，2例腦梗死，1例腎功能不全，1例感染性休克，平均住院時間10個月。4例細(xì)菌感染患者最終2例存活，2例死亡。
　　結(jié)論:
　　1.我院臨床分

7、離的對碳青霉烯類抗生素不敏感的腸桿菌科細(xì)菌主要以肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌為主，在臨床主要引起病人下呼吸道感染，對臨床常用抗菌藥物表現(xiàn)為多重耐藥。
　　2.我院腸桿菌科細(xì)菌已出現(xiàn)產(chǎn)NDM-1菌株，其主要引起病人泌尿系統(tǒng)感染和下呼吸道感染。年老體弱，嚴(yán)重的基礎(chǔ)疾病，長期住院，侵入性治療，這些都是產(chǎn)NDM-1菌株產(chǎn)生的誘發(fā)因素。感染產(chǎn)NDM-1菌株患者的死亡是由嚴(yán)重的基礎(chǔ)疾病引起的，而與感染產(chǎn)NDM-1細(xì)菌并無直接的關(guān)系。
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